观察Krüppel样因子4(KLF4)对转化生长因子(TGF)-β1诱导的人骨髓间充质干细胞(BMSCs)向髓核样细胞分化的影响。
方法实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot检测TGF-β1诱导BMSCs 7 d和14 d对KLF4 mRNA和蛋白表达的影响；建立KLF4过表达BMSC细胞株，用TGF-β1诱导7 d或14 d，细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖，Real-time PCR和Western blot分析髓核细胞相关蛋白聚集蛋白聚糖(Aggrecan)、Ⅱ型胶原蛋白α1链(Col2A1)、性别决定区Y框蛋白9(SOX9)、角蛋白19(KRT19)和叉头蛋白(FOXF1)表达。
结果与对照组比较，TGF-β1诱导后KLF4 mRNA和蛋白表达均显著降低(第7天mRNA：0.653±0.083比1.027±0.068，t＝6.012，P<0.01；第14天mRNA：0.453±0.065比1.063±0.096，t＝9.105，P<0.01；第7天蛋白，0.601±0.112比0.873±0.051，t＝3.874，P<0.05；第14天蛋白：0.251±0.087比0.893±0.078，t＝9.543，P<0.01)，细胞增殖增加(第7天，166.355±11.132比99.647±6.220，t＝9.064，P<0.01；第14天：195.333±10.512比124.667±9.609，t＝8.598，P<0.01)，Aggrecan、Col2A1、SOX9、KRT19、FOXF1 mRNA (Aggrecan：2.600±0.255比1.017±0.095，t＝10.07，P<0.01；Col2A1：3.441±0.259比1.010±0.076，t＝15.58，P<0.01；SOX9：2.767±0.139比1.033±0.111，t＝16.92，P<0.01；KRT19：3.710±0.210比1.005±0.076，t＝20.95，P<0.01；FOXF1：2.783±0.174比1.035±0.132，t＝13.88，P<0.01)和蛋白(Aggrecan：0.760±0.072比0.233±0.055，t＝10.05，P<0.01；Col2A1：0.941±0.046比0.190±0.040，t＝21.36，P<0.01；SOX9：1.237±0.140比0.317±0.065，t＝10.31，P<0.01；KRT19：0.897±0.072比0.137±0.051，t＝14.84，P<0.01；FOXF1：1.033±0.191比0.181±0.056，t＝7.434，P<0.01)表达升高。与TGF-β1单独处理比较，过表达KLF4抑制了细胞增殖(第7天：125.750 ±10.386比166.355±11.132，t＝4.620，P<0.05；第14天：148.526±13.449比195.333±10.512，t＝4.702，P<0.01)，降低了Aggrecan、Col2A1、SOX9、KRT19、FOXF1 mRNA (Aggrecan：1.510±0.187比2.600±0.255，t＝5.970，P<0.01；Col2A1：1.727±0.254比3.441±0.259，t＝8.176，P<0.01；SOX9：1.493±0.169比2.767±0.139，t＝10.08，P<0.01；KRT19：2.117±0.387比3.710±0.210，t＝6.273，P<0.01；FOXF1：1.550±0.125比2.783±0.174，t＝9.978，P<0.01)和蛋白(Aggrecan：0.423±0.093比0.760±0.072，t＝4.958，P<0.01；Col2A1：0.490±0.079比0.941±0.046，t＝8.504，P<0.01；SOX9：0.560±0.096比1.237±0.140，t＝6.890，P<0.01；KRT19：0.375±0.047比0.897±0.072，t＝10.49，P<0.01；FOXF1：0.537±0.097比1.033±0.191，t＝4.017，P<0.05)表达。
结论KLF4过表达可抑制BMSC细胞增殖和向髓核样细胞分化。