人TNFRI cDNA的克隆及酵母表达载体的构建

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zz123251234

【摘要】

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本实验利用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)以人单核淋巴细胞系U937细胞总RNA为模板,扩增出人TNFRI型受体胞外区约224个氨基酸残基的cDNA序列,将此片段为模板,采用剿式PCR技术扩

【作者】

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代佳平毛琼国王燕梁红刘昕

【机构】

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第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室

【出处】

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第三军医大学学报

【发表日期】

：

2004年17期

【关键词】

：

TNFRIcDNA RT-PCR 载体构建

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本实验利用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)以人单核淋巴细胞系U937细胞总RNA为模板,扩增出人TNFRI型受体胞外区约224个氨基酸残基的cDNA序列,将此片段为模板,采用剿式PCR技术扩增出编码TNFRI胞外区约180个氨基酸的DNA序列,将其克隆于载体PDM18-T进行序列测定,随后构建于新型酵母表达载体PGBKT7-DNA-BD,为进一步通过酵母双杂交获得拮抗TNFRI的具有生物学活性的多肽奠定了基础.

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