【摘 要】
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为了构建针对水环境中邻苯二甲酸二乙酯(Diethyl phthalate,DEP)等邻苯二甲酸酯类(Phthalates,PAEs)化合物的免疫学快速检测方法,需获得高效稳定的分泌抗DEP单克隆抗体的杂交
【基金项目】
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科技部海洋重大专项(2016YFC1402403)
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为了构建针对水环境中邻苯二甲酸二乙酯(Diethyl phthalate,DEP)等邻苯二甲酸酯类(Phthalates,PAEs)化合物的免疫学快速检测方法,需获得高效稳定的分泌抗DEP单克隆抗体的杂交瘤细胞株。本文以邻苯二甲酸单乙酯(Monoethylphthalate,MEP)-BSA为免疫抗原免疫BALb/c小鼠,间接竞争ELISA测定小鼠血清效价,用细胞融合筛选技术筛选抗DEP单克隆抗体杂交瘤细胞株。结果显示,实验小鼠免疫血清效价最高能达到1:5000,经过HAT筛选、复检和亚克隆后得到9个能分泌抗DEP单克隆抗体的细胞株,细胞株上清液效价最高能达到1:10000,对DEP的抑制率最高能达到86.5%,且其对11种结构类似物的交叉反应率均低于0.1%,特异性较好。研究表明,本方法成功构建的杂交瘤细胞株能稳定高效分泌抗DEP单克隆抗体,为DEP的ELISA检测方法建立及胶体金免疫层析(Colloidal gold immunochromatography assay,GICA)试纸条的研制提供了稳定高效的单克隆抗体源。(图8表2参23)
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