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摘要：目的：旨在从细胞、亚细胞水平动态探讨活血化瘀及健脾益气法对大鼠高脂性早期脂肪肝病理形态的影响。方法：Wistar雌雄大鼠随机分为4组，即正常组、脂肪肝组、健脾益气组和活血化瘀组。正常组给予普通饲料喂养，其余各组复制早期高脂性脂肪肝模型，造模的同时分别以活血化瘀法代表方膈下逐瘀汤和健脾益气法代表方参苓白术散进行干预，观察第4、8周肝细胞及超微结构的变化。结果：两法均可明显改善光镜和电镜下大鼠肝脂肪变性的程度，但是活血化瘀方药作用效果明显优于健脾益气方药，且其作用效果随着用药时间的延长而增强(P<0.01)。结论：2法均可防治高脂性大鼠早期脂肪肝，但是活血化瘀法作用效果明显优于健脾益气法。
关键词：活血化瘀法；健脾益气法；早期脂肪肝；肝细胞结构；肝超微结构；大鼠
中图分类号：R285.5
文献标识码：A
文章编号：1007－2349(2010)06－0061－02
脂肪肝(FattyLiver，FL)是最常见的弥漫性肝病之一，其以肝细胞内甘油三酯(TG)蓄积过多为主要病理改变。从病理上分包括单纯性脂肪肝、脂肪性肝炎、脂肪性肝纤维化和脂肪性肝硬化等主要类型。祖国医学并无脂肪肝的病名，但从症状表现与脂肪肝相似者很早就有论述。认为湿、痰、瘀互结，痹阻于肝脏脉络形成脂肪肝。笔者以早期脂肪肝为研究重点，旨在从细胞、亚细胞水平动态观察活血化瘀及健脾益气法对大鼠高脂性早期脂肪肝病理形态的影响，比较两种治法的优劣，为临床治疗提供实验依据。
1 材料与方法
1，1 动物及分组 Wistar大鼠(四川省医学科学院实验动物研究所)，清洁级，体重200±20g，雌雄各半。适应环境1周后，随机分为正常组、脂肪肝组、活血化瘀组、健脾益气组，每组16只。
1，2 药物及主要仪器 活血化瘀法使用方药膈下逐瘀汤，选自《医林改错》。健脾益气法使用方药参苓白术散，选自《太平惠民和剂局方》。以上药物购自云南中医学院门诊部。光学显微镜(OLYMPUSCX31，JAPAN)。JEM－1011透射电镜(昆明医学院提供)。病理图像分析系统(MoticImagesPlus2.0，MotieChinaGroupCO，Ltd)。
1，3 方法 常规饲养1周后，正常组给予普通饲料喂养，其余各组均饲以高脂饲料(88％普通饲料+10％猪油+2％胆固醇)。从试验开始的第1天即给药，正常组、脂肪肝组灌胃给予生理盐水(1.5mL／100g)，健脾益气组灌胃给予参苓白术散，活血化瘀组灌胃给予膈下逐瘀汤，每天1次，1.5mL／100g体重，浓度为1.2g生药／mL。分别于第4、8周取同一部位肝组织做光镜和电镜观察病理形态的改变。光镜结果用1个视野中肝细胞脂肪变性的病变面积占整个视野面积的百分比值来表示，选取5个病变视野的平均值作为最终结果。电镜采用描述性方式来反映结果。
1，4 统计方法 数据结果以x±s表示，如果数据符合正态分布。方差齐用t检验，方差不齐用t检验。如果数据不符合正态性分布，方差不齐采用多个样本比较的秩和检验(Kruskal－Wallls)法及两两比较的秩和检验(Wilcoxon)法。
2 结果
2，1 对肝细胞结构的影响 脂肪肝组肝脏脂肪变性病变占整一视野百分比与正常组相比，第4、8周均有非常显著性差异(P<0.01)。活血化瘀方药干预后，与脂肪肝组相比，第4周P<0.05，第8周P<0.01，且与健脾益气组比P<0.05。健脾益气方药干预后，与脂肪肝组相比，第4周及第8周均P<0.05。见表1。
2，2 对肝超微结构的影响 脂肪肝组第4周胞浆内可见大小不一的圆形脂滴，胞浆中粗面内质网扩张，少部分可见脱颗粒现象。线粒体肿胀扩张。嵴模糊或空泛。未见肝细胞坏死的形态变化。第8周上述改变加重，未见肝细胞坏死的形态变化。活血化瘀组及健脾益气组第4、8周胞浆内大小不一的圆形脂滴数量减少，粗面内质网扩张程度，线粒体肿胀扩张和嵴模糊程度均有所减轻，但活血化瘀组减轻更明显。见图1～6。
3 讨论
早期脂肪肝是以甘油三酯(TO)蓄积过多为主要病理特征，光镜下表现为肝细胞体积增大，胞质内可出现大小不等的脂肪空泡，严重者空泡融合将细胞核挤向胞膜下，不见肝细胞气球样变、点状坏死、灶状坏死等。电镜下胞浆内可见大小不一的圆形脂滴，胞浆中粗面内质网扩张，少部分可见脱颗粒现象。线粒体肿胀扩张，嵴模糊或空泛。本研究表明活血化瘀及健脾益气2法均可明显改善光镜和电镜下大鼠肝脂肪变性的程度，但是活血化瘀方药作用效果明显优于健脾益气方药，且其作用效果随着用药时间的延长而增强。
关键词：活血化瘀法；健脾益气法；早期脂肪肝；肝细胞结构；肝超微结构；大鼠
中图分类号：R285.5
文献标识码：A
文章编号：1007－2349(2010)06－0061－02
脂肪肝(FattyLiver，FL)是最常见的弥漫性肝病之一，其以肝细胞内甘油三酯(TG)蓄积过多为主要病理改变。从病理上分包括单纯性脂肪肝、脂肪性肝炎、脂肪性肝纤维化和脂肪性肝硬化等主要类型。祖国医学并无脂肪肝的病名，但从症状表现与脂肪肝相似者很早就有论述。认为湿、痰、瘀互结，痹阻于肝脏脉络形成脂肪肝。笔者以早期脂肪肝为研究重点，旨在从细胞、亚细胞水平动态观察活血化瘀及健脾益气法对大鼠高脂性早期脂肪肝病理形态的影响，比较两种治法的优劣，为临床治疗提供实验依据。
1 材料与方法
1，1 动物及分组 Wistar大鼠(四川省医学科学院实验动物研究所)，清洁级，体重200±20g，雌雄各半。适应环境1周后，随机分为正常组、脂肪肝组、活血化瘀组、健脾益气组，每组16只。
1，2 药物及主要仪器 活血化瘀法使用方药膈下逐瘀汤，选自《医林改错》。健脾益气法使用方药参苓白术散，选自《太平惠民和剂局方》。以上药物购自云南中医学院门诊部。光学显微镜(OLYMPUSCX31，JAPAN)。JEM－1011透射电镜(昆明医学院提供)。病理图像分析系统(MoticImagesPlus2.0，MotieChinaGroupCO，Ltd)。
1，3 方法 常规饲养1周后，正常组给予普通饲料喂养，其余各组均饲以高脂饲料(88％普通饲料+10％猪油+2％胆固醇)。从试验开始的第1天即给药，正常组、脂肪肝组灌胃给予生理盐水(1.5mL／100g)，健脾益气组灌胃给予参苓白术散，活血化瘀组灌胃给予膈下逐瘀汤，每天1次，1.5mL／100g体重，浓度为1.2g生药／mL。分别于第4、8周取同一部位肝组织做光镜和电镜观察病理形态的改变。光镜结果用1个视野中肝细胞脂肪变性的病变面积占整个视野面积的百分比值来表示，选取5个病变视野的平均值作为最终结果。电镜采用描述性方式来反映结果。
1，4 统计方法 数据结果以x±s表示，如果数据符合正态分布。方差齐用t检验，方差不齐用t检验。如果数据不符合正态性分布，方差不齐采用多个样本比较的秩和检验(Kruskal－Wallls)法及两两比较的秩和检验(Wilcoxon)法。
2 结果
2，1 对肝细胞结构的影响 脂肪肝组肝脏脂肪变性病变占整一视野百分比与正常组相比，第4、8周均有非常显著性差异(P<0.01)。活血化瘀方药干预后，与脂肪肝组相比，第4周P<0.05，第8周P<0.01，且与健脾益气组比P<0.05。健脾益气方药干预后，与脂肪肝组相比，第4周及第8周均P<0.05。见表1。
2，2 对肝超微结构的影响 脂肪肝组第4周胞浆内可见大小不一的圆形脂滴，胞浆中粗面内质网扩张，少部分可见脱颗粒现象。线粒体肿胀扩张。嵴模糊或空泛。未见肝细胞坏死的形态变化。第8周上述改变加重，未见肝细胞坏死的形态变化。活血化瘀组及健脾益气组第4、8周胞浆内大小不一的圆形脂滴数量减少，粗面内质网扩张程度，线粒体肿胀扩张和嵴模糊程度均有所减轻，但活血化瘀组减轻更明显。见图1～6。
3 讨论
早期脂肪肝是以甘油三酯(TO)蓄积过多为主要病理特征，光镜下表现为肝细胞体积增大，胞质内可出现大小不等的脂肪空泡，严重者空泡融合将细胞核挤向胞膜下，不见肝细胞气球样变、点状坏死、灶状坏死等。电镜下胞浆内可见大小不一的圆形脂滴，胞浆中粗面内质网扩张，少部分可见脱颗粒现象。线粒体肿胀扩张，嵴模糊或空泛。本研究表明活血化瘀及健脾益气2法均可明显改善光镜和电镜下大鼠肝脂肪变性的程度，但是活血化瘀方药作用效果明显优于健脾益气方药，且其作用效果随着用药时间的延长而增强。