【摘 要】
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【目的】克隆人 VEGF165基因,构建其真核表达质粒 pAdtrack-CMV-VEGF165,活体定向转染动脉粥样硬化兔再狭窄血管,检测其表达情况。【方法】PCR 法从人心脏 cDNA 文库钓取人 V
【机 构】
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广东省心血管病研究所心内科;广东省心血管病研究所心内科广东广州510080;广东广州510080;
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【目的】克隆人 VEGF165基因,构建其真核表达质粒 pAdtrack-CMV-VEGF165,活体定向转染动脉粥样硬化兔再狭窄血管,检测其表达情况。【方法】PCR 法从人心脏 cDNA 文库钓取人 VEGF 基因,插入 pUC19载体测序后与真核表达质粒 pAdtrack-CMV 连接构建 pAdtrack-CMV-VEGF165,PTCA 球囊导管介导基因转移至动脉粥样硬化兔再狭窄血管局部,检测基因在局部及远离部位表达情况,以及对肝肾功能的影响。【结果】①转染 pAdtrack-CMV-VEGF165的动物血管荧光显微镜下观察再狭窄局部可见黄绿色荧光条带,并检测到人 VEGF165基因的表达;②远离脏器无转染基因表达;③对肝肾功能无明显影响。【结论】成功将目的基因定向转移至靶部位并获有效表达,对重要脏器功能无明显影响。
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