【摘 要】
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为建立赤松根际土壤微生物的PCR-DGGE反应体系,以赤松根际土壤为材料,利用PCR-DGGE技术,对反应体系中的几个重要因素不同梯度进行优化,包括模板DNA、dNTPs、引物及Mg2+的用量
【机 构】
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延边大学农学院,中国林业科学院,龙井市农业局
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为建立赤松根际土壤微生物的PCR-DGGE反应体系,以赤松根际土壤为材料,利用PCR-DGGE技术,对反应体系中的几个重要因素不同梯度进行优化,包括模板DNA、dNTPs、引物及Mg2+的用量。在25μL PCR反应体系中,模板DNA浓度为10ng,dNTPs浓度为0.15 mM,引物浓度为0.32μM,Mg2+浓度为1.0mM时,其PCR效果最佳。用该反应体系扩增出来的PCR产物,在DGGE凝胶上能够清晰地分辨出赤松根际土壤细菌和真菌多样性。这为进一步研究赤松根际土壤微生物,特别是研究赤松外生菌根奠定了基础。
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