【摘 要】
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目的从铜绿假单胞菌克隆出硫酸化胆汁酸水解酶（BSS）基因，并表达蛋白产物、研究其活性。方法通过序列比对确定铜绿假单胞菌中的目的序列BSS H1；通过PCR扩增获得BSSH1基因全序列，将
【机 构】
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四川大学华西基础医学与法医学院生物化学教研室,化学工程学院化学工程系
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目的从铜绿假单胞菌克隆出硫酸化胆汁酸水解酶（BSS）基因，并表达蛋白产物、研究其活性。方法通过序列比对确定铜绿假单胞菌中的目的序列BSS H1；通过PCR扩增获得BSSH1基因全序列，将其插入pET30b（＋）载体，并将重组表达载体转化到大肠杆菌BL21（DE3）中诱导表达。通过优化诱导表达条件，实现重组蛋白BSS H1的高效表达；通过BSS－HSD酶联法初步研究其酶活性质。结果工程菌扩大培养3h、以终浓度为1mmol／L IPTG诱导5h时蛋白表达量最高；研究发现BSS H1能催化底物牛成3α和3B两种
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