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[目的]筛选冬凌草内生真菌抗肿瘤活性菌株，为开发利用冬凌草内生真菌资源提供依据。[方法]以药用植物冬凌草为试验材料，分离筛选能产抗肿瘤活性物质的内生真菌。通过组织分离法，从贵州省施秉县产冬凌草中分离到152株植物内生真菌，利用抗肿瘤体外细胞增殖抑制筛选模型（SRB法）对其进行活性检测。[结果]结果表明，20株内生真菌（占总分离菌株的13.1%）对人慢性髓性白血病K562细胞具有显著的增殖抑制活性。[结论]冬凌草内生真菌是寻找抗肿瘤活性代谢产物的良好资源。