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【摘要】目的 通过观察瑞香狼毒正交炮制品对大鼠抗炎试验,对所得数据进行正交分析进而筛选出抗炎效果最好的一种炮制工艺。方法 根据瑞香狼毒抗炎作用,瑞香狼毒水煎膏对试验性金黄色葡萄球菌创伤溶菌酶含量测定实验观察9种工艺的抗炎作用。并选出对其抗炎作用影响的主要炮制因素最佳炮制工艺。结果 抗炎效果最佳工艺A1B3C1。
【关键词】瑞香狼毒抗炎正交分析
【中图分类号】R115 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484(2010)03-00-02
raditional Mongolian Medicine Stellera chamaejasme the best cooked up the water decoction of the screening process
【Abstract】Objective Orthogonal by observing the processed products Stellera chamaejasme anti-inflammatory tests in rats, pairs of orthogonal analysis of the data and then filter out the best kind of anti-inflammatory effects of processing technology. Method According to Stellera chamaejasme anti-inflammatory effect of water decoction of the pilot Stellera chamaejasme Staphylococcus aureus wound observation of lysozyme determination of nine kinds of experimental anti-inflammatory process. And elected to its anti-inflammatory effects of the major factors that concocted the best processing technology. Result The optimum anti-inflammatory effects A1B3C1。
【Key words】Stellera chamaejasme; anti-inflammatory; orthogonal analysis;
瑞香狼毒Stellera chamaejasme L.为瑞香科狼毒属植物。又名断肠草、山萝卜、红狼毒等,瑞香狼毒的干燥根是历代本草记载的狼毒的正品。蒙药名有达楞图如和少格兴。目前,瑞香狼毒中已知的成分主要有倍半萜内酯、二萜生物碱、三萜苷及香豆素等,而且新化合物还在不断被发现。瑞香狼毒具有很高的药用价值,近年来采用高科技研究手段,国内外学者对瑞香狼毒的化学成分,药理作用及临床应用有系统的研究,取得了突破性的进展。瑞香狼毒除抗癌作用外还有抗菌、抗炎、镇痛作用。从瑞香狼毒中提取的狼毒苷能抑制真菌及金黄色葡萄球菌的生长,用瑞香狼毒制剂治疗多种瘙痒性皮肤病有明显的止痒作用[1]。另外,瑞香狼毒有很强的刺激性, 可引起皮肤和黏膜炎症、充血、水肿等;过量服用可致中毒, 出现口干麻木, 头昏,肢体软弱无力, 疲倦欲睡, 恶心, 呕吐, 腹部不适,甚则腹痛、腹泻(出血性便)而休克。文献报道其中的主要有效成分尼地吗啉亦有较大毒性, ip 剂量超过0.05mg/kg时即出现毒性反应[2]。现有资料显示,国内对瑞香狼毒的药理作用的研究报道较多,但对蒙医传统特色炮制方法的研究报道甚少。影响瑞香狼毒药效发挥的因素很多,其中以炮制方法最为重要。瑞香狼毒的传统炮制工艺有:瑞香狼毒膏(经加水10L煎煮3次,煎煮2h后浓缩制得)、奶制瑞香狼毒1(经加奶3L,煎煮30—40min,晾干制得)、奶制瑞香狼毒2(经加奶1—2L,浸泡,晾干制得)。经前期药理实验结果表明三种炮制品的最大耐受量均为2.8g/kg。经热板镇痛实验结果表明,三种炮制品均有镇痛作用,强弱顺序为狼毒膏、奶制瑞香狼毒2、奶制瑞香狼毒1。对新鲜蛋清致大鼠足趾肿胀有抑制作用,抑制作用强度顺序为:奶制瑞香狼毒2、狼毒膏、奶制瑞香狼毒1,三种炮制品中奶制瑞香狼毒2镇痛、抗炎作用最好。由此我们对狼毒水煎膏应用正交分析的方法研究炮制工艺中的影响因素。
表1瑞香狼毒水煎膏炮制正交试验因素水平表L9(34)
1 材料
1.1 受试样品
来源炮制品瑞香狼毒由内蒙古医学院提供
9种狼毒膏正交炮制品
配制方法:取狼毒膏,溶于纯化水中制成混悬液
1.2 试剂
溶菌酶试剂盒南京建成生物工程研究所批号:20090313
1.3 实验动物
Wister大鼠,雄性,体重160±20g,动物证号:SCXK(蒙)2009-0001
内蒙古大学实验动物实验中心提供
表2 对试验性金黄色葡萄球菌创伤溶菌酶含量的影响
表3 瑞香狼毒水煎膏炮制正交试验表
实验环境:内蒙古食品药品检验所屏障级动物实验室,许可证号:SYXK(蒙)2009-0001
1.4 实验仪器
Mettle PL2002型电子天平(梅特勒—托利多仪器厂)
UV-2450型紫外分光光度计 (岛津公司)
2 试验方法及结果
2.1 对试验性金黄色葡萄球菌创伤溶菌酶含量的影响
2.1.1 疮疡动物模型的制备
取大鼠66只随机分为4组,即空白组、模型组、给药组(9种瑞香狼毒水煎膏正交炮制品),除空白组外,其余大鼠背部去毛,皮肤消毒后切开两个1cm的伤口,深达皮下,每个伤口注入5—10亿个金黄色葡萄球菌,两天后伤口周围出现红肿,脓性分泌物,即造模成功。造模成功后给药组隔天涂抹瑞香狼毒水煎膏,于给药第8天测血清中的溶菌酶。
2.1.2 溶菌酶的测定
给药第八天,大鼠断头取血于离心管中,3000rpm离心10min,取血清后用溶菌酶检测试剂盒自身对照法进行测试。对溶菌酶含量做正交分析。
表4 瑞香狼毒工艺的方差分析
3 瑞香狼毒水煎膏正交炮制品抗炎镇痛试验结果讨论
通过表3直观分析可看出极差R最大者为B因素水煎时间,为影响抗炎作用的主要因素,其次为A因素水倍量,C因素煎煮次数对抗炎作用影响可忽略不计。直观分析结果表明瑞香狼毒水煎膏抗炎作用最佳炮制工艺组成为A1B3C1即水8倍量,水煎1.5h,水煎1次。
可由方差分析表4看出水倍量、水煎时间、水煎次数三因素对瑞香狼毒水煎膏的抗炎作用影响均无显著性(P>0.1)。
参考文献
[1]张美妮,刘玉玺,王明正.瑞香狼毒研究进展[J].浙江中医杂志,1992,7(27):331.
[2]杨仓良.毒药本草[M].北京:中国中医药出版社1993:1022.
[3]陈奇,主编.药理实验方法学[M],北京:人民卫生出版社,1995.300-350.
[4]徐吉民,主编.正交法在医药科研中的应用.中国医药科技出版社,1987第10版.
[5]孙芳云,张斌,朱深银等 西藏地产藏药瑞香狼毒的抗炎作用研究[J].中成药,2007年5月第29卷,第5期.
作者单位:内蒙古食品药品检验所药理室010020
【关键词】瑞香狼毒抗炎正交分析
【中图分类号】R115 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484(2010)03-00-02
raditional Mongolian Medicine Stellera chamaejasme the best cooked up the water decoction of the screening process
【Abstract】Objective Orthogonal by observing the processed products Stellera chamaejasme anti-inflammatory tests in rats, pairs of orthogonal analysis of the data and then filter out the best kind of anti-inflammatory effects of processing technology. Method According to Stellera chamaejasme anti-inflammatory effect of water decoction of the pilot Stellera chamaejasme Staphylococcus aureus wound observation of lysozyme determination of nine kinds of experimental anti-inflammatory process. And elected to its anti-inflammatory effects of the major factors that concocted the best processing technology. Result The optimum anti-inflammatory effects A1B3C1。
【Key words】Stellera chamaejasme; anti-inflammatory; orthogonal analysis;
瑞香狼毒Stellera chamaejasme L.为瑞香科狼毒属植物。又名断肠草、山萝卜、红狼毒等,瑞香狼毒的干燥根是历代本草记载的狼毒的正品。蒙药名有达楞图如和少格兴。目前,瑞香狼毒中已知的成分主要有倍半萜内酯、二萜生物碱、三萜苷及香豆素等,而且新化合物还在不断被发现。瑞香狼毒具有很高的药用价值,近年来采用高科技研究手段,国内外学者对瑞香狼毒的化学成分,药理作用及临床应用有系统的研究,取得了突破性的进展。瑞香狼毒除抗癌作用外还有抗菌、抗炎、镇痛作用。从瑞香狼毒中提取的狼毒苷能抑制真菌及金黄色葡萄球菌的生长,用瑞香狼毒制剂治疗多种瘙痒性皮肤病有明显的止痒作用[1]。另外,瑞香狼毒有很强的刺激性, 可引起皮肤和黏膜炎症、充血、水肿等;过量服用可致中毒, 出现口干麻木, 头昏,肢体软弱无力, 疲倦欲睡, 恶心, 呕吐, 腹部不适,甚则腹痛、腹泻(出血性便)而休克。文献报道其中的主要有效成分尼地吗啉亦有较大毒性, ip 剂量超过0.05mg/kg时即出现毒性反应[2]。现有资料显示,国内对瑞香狼毒的药理作用的研究报道较多,但对蒙医传统特色炮制方法的研究报道甚少。影响瑞香狼毒药效发挥的因素很多,其中以炮制方法最为重要。瑞香狼毒的传统炮制工艺有:瑞香狼毒膏(经加水10L煎煮3次,煎煮2h后浓缩制得)、奶制瑞香狼毒1(经加奶3L,煎煮30—40min,晾干制得)、奶制瑞香狼毒2(经加奶1—2L,浸泡,晾干制得)。经前期药理实验结果表明三种炮制品的最大耐受量均为2.8g/kg。经热板镇痛实验结果表明,三种炮制品均有镇痛作用,强弱顺序为狼毒膏、奶制瑞香狼毒2、奶制瑞香狼毒1。对新鲜蛋清致大鼠足趾肿胀有抑制作用,抑制作用强度顺序为:奶制瑞香狼毒2、狼毒膏、奶制瑞香狼毒1,三种炮制品中奶制瑞香狼毒2镇痛、抗炎作用最好。由此我们对狼毒水煎膏应用正交分析的方法研究炮制工艺中的影响因素。
表1瑞香狼毒水煎膏炮制正交试验因素水平表L9(34)
1 材料
1.1 受试样品
来源炮制品瑞香狼毒由内蒙古医学院提供
9种狼毒膏正交炮制品
配制方法:取狼毒膏,溶于纯化水中制成混悬液
1.2 试剂
溶菌酶试剂盒南京建成生物工程研究所批号:20090313
1.3 实验动物
Wister大鼠,雄性,体重160±20g,动物证号:SCXK(蒙)2009-0001
内蒙古大学实验动物实验中心提供
表2 对试验性金黄色葡萄球菌创伤溶菌酶含量的影响
表3 瑞香狼毒水煎膏炮制正交试验表
实验环境:内蒙古食品药品检验所屏障级动物实验室,许可证号:SYXK(蒙)2009-0001
1.4 实验仪器
Mettle PL2002型电子天平(梅特勒—托利多仪器厂)
UV-2450型紫外分光光度计 (岛津公司)
2 试验方法及结果
2.1 对试验性金黄色葡萄球菌创伤溶菌酶含量的影响
2.1.1 疮疡动物模型的制备
取大鼠66只随机分为4组,即空白组、模型组、给药组(9种瑞香狼毒水煎膏正交炮制品),除空白组外,其余大鼠背部去毛,皮肤消毒后切开两个1cm的伤口,深达皮下,每个伤口注入5—10亿个金黄色葡萄球菌,两天后伤口周围出现红肿,脓性分泌物,即造模成功。造模成功后给药组隔天涂抹瑞香狼毒水煎膏,于给药第8天测血清中的溶菌酶。
2.1.2 溶菌酶的测定
给药第八天,大鼠断头取血于离心管中,3000rpm离心10min,取血清后用溶菌酶检测试剂盒自身对照法进行测试。对溶菌酶含量做正交分析。
表4 瑞香狼毒工艺的方差分析
3 瑞香狼毒水煎膏正交炮制品抗炎镇痛试验结果讨论
通过表3直观分析可看出极差R最大者为B因素水煎时间,为影响抗炎作用的主要因素,其次为A因素水倍量,C因素煎煮次数对抗炎作用影响可忽略不计。直观分析结果表明瑞香狼毒水煎膏抗炎作用最佳炮制工艺组成为A1B3C1即水8倍量,水煎1.5h,水煎1次。
可由方差分析表4看出水倍量、水煎时间、水煎次数三因素对瑞香狼毒水煎膏的抗炎作用影响均无显著性(P>0.1)。
参考文献
[1]张美妮,刘玉玺,王明正.瑞香狼毒研究进展[J].浙江中医杂志,1992,7(27):331.
[2]杨仓良.毒药本草[M].北京:中国中医药出版社1993:1022.
[3]陈奇,主编.药理实验方法学[M],北京:人民卫生出版社,1995.300-350.
[4]徐吉民,主编.正交法在医药科研中的应用.中国医药科技出版社,1987第10版.
[5]孙芳云,张斌,朱深银等 西藏地产藏药瑞香狼毒的抗炎作用研究[J].中成药,2007年5月第29卷,第5期.
作者单位:内蒙古食品药品检验所药理室010020