【摘 要】
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目的 探讨遗传性对称性色素异常症致病基因ADAR1对Wnt11表达和酪氨酸酶活性的影响.方法 将HaCaT细胞等细胞数量分为对照组、实验1组、实验2组、实验3组.用3种针对ADAR1基因的shRNA质粒分别沉默3个实验组中HaCaT细胞的ADAR1基因,用Western印迹法检测4个组HaCaT细胞相关蛋白的表达水平.建立HaCaT细胞与黑素瘤细胞A375共培养模型,对实验组(HaCaT细胞中的A
【机 构】
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200011上海交通大学医学院附属第九人民医院皮肤科,200011上海交通大学医学院附属第九人民医院皮肤科,200011上海交通大学医学院附属第九人民医院皮肤科,200011上海交通大学医学院附属第九
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目的 探讨遗传性对称性色素异常症致病基因ADAR1对Wnt11表达和酪氨酸酶活性的影响.方法 将HaCaT细胞等细胞数量分为对照组、实验1组、实验2组、实验3组.用3种针对ADAR1基因的shRNA质粒分别沉默3个实验组中HaCaT细胞的ADAR1基因,用Western印迹法检测4个组HaCaT细胞相关蛋白的表达水平.建立HaCaT细胞与黑素瘤细胞A375共培养模型,对实验组(HaCaT细胞中的ADAR1和Wnt 11蛋白低表达)与对照组(HaCaT细胞中的ADAR1和Wnt11蛋白正常表达)的细胞形态和酪氨酸酶活性进行比较.结果 蛋白印迹法发现,ADAR1基因沉默的HaCaT细胞中的Wnt 11蛋白条带灰度值明显低于正常HaCaT细胞中的Wnt 11蛋白条带灰度值,证实HaCaT细胞中的ADAR1基因沉默后,Wnt11蛋白的表达水平明显下降.在共培养模型中,实验组HaCaT细胞与A375细胞连接处的树突状突起明显少于对照组,实验组A375细胞的酪氨酸酶活性与对照组相比显著降低,减去空白组A值后,实验组A值为0.0168±0.0069,对照组为0.0490±0.0132,P＜ 0.01.结论 HaCaT细胞中ADAR1基因沉默可降低Wnt 11的表达,并影响A375细胞酪氨酸酶活性。
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