恒河猴 p53基因沉默靶点在细胞水平的验证

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目的:为建立恒河猴 p53基因沉默模型,首先在细胞水平筛选和测定恒河猴 p53基因有效沉默靶点。方法测定非洲绿猴肾来源成纤维细胞 COS-7中 p53基因的表达水平;对恒河猴 p53基因做生物信息学分析,优选靶序列设计 shRNA,克隆入慢病毒载体 FUGW-TDT,转染 COS-7细胞,以 real-time PCR 检测 p53 mRNA 抑制水平,以 Western blot 检测 p53蛋白水平表达变化。结果在 COS-7细胞检测到 p53基因的表达;生物信息学筛选到3个靶片段,分别位于 p53
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