荧光定量RT-PCR检测糖尿病病人PBMC中TGF-β1表达水平

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目的:应用荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ—RT—PCR),检测糖尿病病人外周血单个核细胞(PBMC)中TGF-β1mRNA的表达水平。方法:分离外周血单个核细胞,用Trizol裂解液提取总RNA,逆转录为cDNA,在扩增体系中加入SYBR Green I,应用FQ—RT—PCR定量检测TGF-β1mRNA。结果:重组质粒测序证明插入的片断为TGF-β1特异性片断。荧光定量RT—PCR检测TGF—β1mRNA的灵敏度达10^5拷贝/ml,线性范围为10^5~10^11拷贝/ml,批内、批问变异系数分别为2
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