瑞氏木霉内切葡聚糖酶Ⅲ基因的克隆及在酿酒酵母中的表达

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【摘要】

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采用刚果红染色法从瑞氏木霉cDNA文库中分离到一株具有CMCase活性的阳性克隆,测序结果显示该基因所编码的蛋白质为瑞氏木霉内切葡聚糖酶Ⅲ(EGⅢ).对重组酿酒酵母所产生的EGⅢ

【作者】

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肖志壮王婷汪天虹曲音波高培基

【机构】

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山东大学

【出处】

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微生物学报

【发表日期】

：

2001年4期

【关键词】

：

内切葡聚糖酶Ⅲ 瑞氏木霉酿酒酵母基因表达蛋白质分泌 Endoglucanase Ⅲ Trichoderma reesei Saccharomyces c

【基金项目】

：

国家自然科学基金

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采用刚果红染色法从瑞氏木霉cDNA文库中分离到一株具有CMCase活性的阳性克隆,测序结果显示该基因所编码的蛋白质为瑞氏木霉内切葡聚糖酶Ⅲ(EGⅢ).对重组酿酒酵母所产生的EGⅢ进行了酶学性质分析,其最适pH为5.0,最适温度为60℃.检测了酿酒酵母蛋白质分泌系统组分SSO2和SEB1对EGⅢ分泌的影响.结果表明,在可过量表达蛋白质分泌系统组分SSO2的酿酒酵母H837中,EGⅢ的分泌量最高.由此分析,酿酒酵母SSO2蛋白可能在EGⅢ的分泌中,是一个限速步骤.通过PCR方法删除EGⅢ基因5＇端非翻译区的9

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