MEK1表达载体的构建及其对肝癌细胞ERK通路活性的影响

来源 :西部医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：luck_chiachang

【摘要】

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目的构建pcDNA3.1（＋）-MEK1真核表达载体，体外转染人肝癌MHCC97H细胞，观察MEK1在肝癌细胞中的表达及其对ERK通路活性的影响。方法应用RT-PCR扩增出MEK1基因插入pcDNA3.1（＋）中，形成重组

【作者】

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梁容瑞周蕊李宗芳李宝华陈昆仑王志东姬媛媛杨军

【机构】

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苏州大学附属第一医院肿瘤科,西安交通大学医学院第二附属医院普通外科干部病房,生物诊断治疗国家地方联合工程研究中心,西安交通大学医学院环境与疾病相关基因教育部重点实验室

【出处】

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西部医学

【发表日期】

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2013年10期

【关键词】

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MEK1 肝癌 MHCC97H 基因表达 MEK1 Hepatocellular carcinoma MHCC97H Gene expression

【基金项目】

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教育部“长江学者和创新团队发展计划”资助（PCSIRT：1171）

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目的构建pcDNA3.1（＋）-MEK1真核表达载体，体外转染人肝癌MHCC97H细胞，观察MEK1在肝癌细胞中的表达及其对ERK通路活性的影响。方法应用RT-PCR扩增出MEK1基因插入pcDNA3.1（＋）中，形成重组载体pcDNA3.1（＋）-MEK1。经测序确认后，利用LipofectamineTM 2000将重组载体转染MHCC97H肝癌细胞，使用含G418的培养基进行筛选；将肝癌细胞分为不转染组、转染空载体组和转染重组载体组，运用Western-blot方法检测MEK1、p-MEK1、ERK1

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