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摘 要：为研究木霉菌菌剂使用方式对黄瓜砧木种子出苗及幼苗生长的影响，以黄瓜砧木品种“砧大力1989”和哈慈木霉菌孢子粉为试验材料，研究了木霉菌菌剂拌基质、拌种、浸种和播种后喷施4种方法对黄瓜砧木种子出苗时间、苗出齐时间、出苗率及幼苗生长的影响。结果表明：4种木霉菌菌剂使用方式都能缩短砧木种子的出土时间，且4种处理方式中，播种后穴盘喷施木霉菌溶液处理砧木种子出土的时间最短，为14.4h。此外，喷施方法明显缩短了砧木幼苗的出齐时间，齐苗时间为52.8h;同时喷施木霉菌菌剂溶液的使用方式明显提高出苗率，达到99.6%。与对照组相比，拌基质处理能显著提高植株的株高，浸种处理显著提高了植株的干鲜重，而拌种处理明显促进了植株根系的生长。
关键词：木霉菌;使用方法;砧木种子;出苗率
中图分类号 S626 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2021）04-0046-03
Abstract： In order to study the effects of application methods of Trichoderma harzianumon on seedling emergenceand development of cucumber rootstock， we investigated the effects of 4 kinds of application methods of Trichoderma harzianum， namely mixing the substrate， seed dressing， soaking seed and spraying after planting， on seedling emergence time，total emergence time， emergence rate and seedling development， and cucumber rootstock seed， “Zhen Dali 1989”， and Trichoderma harzianumon spores were used as experimental materials. The results showed that all of four methods of Trichoderma harzianumon could shorten the emergence time of rootstock seeds， and among four treatment methods， the emergence time of cucumber rootstock seeds was the shortest time， up to14.4h， under the treatment of spraying the solution of Trichoderma harzianumon. Moreover， spraying the solution of Trichoderma harzianumon could significantly shorten the seedling emergence time of rootstock seeds， total emergence time being 52.8h; Meanwhile， spraying the solution of Trichoderma harzianumon also markedly enhanced the seedling emergence rate， up to 99.6%. Compared with the control， the treatment of mixing the substrate could significantly improve the height of seedlings， and the dry and fresh weight of the plant could be obviously increased by soaking seed treatment; however， seed dressing treatment remarkably promoted the growth of plant roots..
Key words： Trichoderma; Application method; Rootstock seed; Emergence rate
黃瓜（Cucumis sativus L.）属于葫芦科一年生蔓生草本植物 ，是我国主要的蔬菜品种之一[1]，深受大众喜爱。近年来，由于长期的连作障碍以及化学农药的不合理使用导致黄瓜病虫害发生愈发严重，从而使黄瓜产量品质严重下降。目前，黄瓜嫁接技术是提高黄瓜品质产量的有效途径[2]。而在嫁接技术中，砧木的选择及培育占有相当重要的地位[3]。
木霉菌（Trichoderma）属于真菌门，半知菌亚门，丝孢纲，丝孢目，粘孢菌类，广泛存在于植物及其残体、根际、土壤中，是典型的土壤和木材腐生真菌，同时也是土壤微生物的重要群落[4]。魏林[5]研究表明，哈茨木霉发酵液能够明显提高豆科种子发芽势促进种子的萌发，促进种子胚根和胚轴的生长，使种子具有比较高的活力指数。朱衍杰[6]研究表明，木霉提取物可以提高国槐种子的发芽率、发芽势、发芽指数，促进国槐种子胚根、胚芽的生长。而且有很多学者研究表明，哈茨木霉菌对大白菜番茄植株都具有良好的促生和防病作用[7-8]。刘畅等[9]研究发现单独施加绿色木霉和哈茨木霉处理的黄瓜幼苗的株高、茎粗、叶宽显著增加。
目前，对于木霉菌的促生作用，多数学者研究多关注于木霉菌的发酵液或提取物对植物种子萌发及生长的影响，而对于对于木霉菌固体孢子粉在种子萌发及育苗中的作用研究较少。因此，本研究以黄瓜砧木品种“砧大力1989”以及哈茨木霉菌DQ002固体孢子粉作为试验材料，探讨木霉菌菌剂的不同使用方法对种子出土时间、出齐时间及出苗率的影响，以及木霉菌剂使用方法对砧木幼苗生长的影响，为木霉菌剂有效应用于培育优质砧木种苗提供科学依据。 1 材料与方法
1.1 材料 供试砧木种子为“砧大力1989”，由青岛金妈妈农业科技有限公司提供。供试木霉菌为哈茨木霉DQ002固体孢子粉由黑龙江八一农垦大学园艺园林学院甜瓜课题组提供。
1.2 试验设计 试验在青岛金妈妈农业科技有限公司温室基地内进行，由青岛金妈妈农业科技有限公司提供的砧木品种作为试验材料，利用穴盘进行播种，所用初始基质为草炭∶蛭石∶珍珠岩=3∶1∶1配制的混合基质，播种前进行种子消毒并晾干，之后再进行试验。设定哈茨木霉菌以下处理：
T1：拌基质处理。按照木霉菌孢子粉∶育苗基质=1∶500（质量比）的比例混合均匀，之后将其分装于穴盘内，之后将种子播种于穴盘内;
T2：种子包衣处理。按照木霉菌孢子粉∶种子=1∶500（质量比）的比例混合均匀，进行拌种处理，之后播种于穴盘内，所用育苗基质未经木霉孢子粉处理;
T3：种子浸种处理。按照木霉菌孢子粉∶种子=1∶500（质量比）的比例，称取木霉菌孢子粉，并溶解于无菌水中，将种子于配制好的菌液中进行浸种8h，然后进行清洗，播种于穴盘内，所用育苗基质未经木霉孢子粉处理;
T4：播种后穴盘喷施。木霉菌菌液按照孢子粉∶水=1∶500（质量比）的比例进行配制。
CK：未进行木霉菌任何处理。清水浸泡种子8h，之后播种于穴盘内，所用育苗基质未经木霉孢子粉处理。
播种于50穴穴盘进行育苗。每个处理5次重复，25个穴盘。各个处理随机摆放，每12h进行1次调查，记录T1、T2、T3、T4 4种木霉菌处理的种子出苗率及出土时间;通过调查5用方式以及出苗15d后采集幼苗进行形态指标的测定。
1.3 测定项目 出土时间：开始出土～50%出土的时间;出齐时间：种子出土50%～90%出土的时间;植株高度、根系长度利用刻度尺进行测定;植株干鲜重利用天平进行测定。
1.4 数据统计与分析 所得数据均使用Microsoft Excel进行图表制作，利用统计软件SPSS20.0进行数据显著性分析。
2 结果与分析
2.1 木霉菌菌剂使用方式对种子出土时间、出齐时间及出苗率的影响 由表1可以得知，与对照（未进行木霉菌任何处理，CK）相比，拌基质、拌种、浸种和喷施4种木霉菌剂使用方式均能缩短砧木种子的出土时间，分别缩短了66.67%、30.0%，且4种处理方式中，播种后穴盘喷施木霉菌菌液促进砧木种子出土的时间最短，为14.4h;而且也能明显缩短砧木种子的齐苗时间，使齐苗时间缩短为52.8h，而对照处理砧木种子齐苗时间为64.8h;同时喷施木霉菌菌液使用方法明显提高了出苗率，达到99.6%。
2.2 木霉菌剂使用方式对砧木幼苗生长的影响 从表2可以看出，与对照（未进行木霉菌任何处理，CK）相比，木霉菌剂的4种处理方法都能显著提高砧木幼苗的株高、干重以及植株根长。其中木霉菌剂拌基质和喷施处理的砧木幼苗株高均显著高于对照（P<0.05），这2种处理的幼苗株高分别增加了13.90%和11.84%;在幼苗鲜重方面，拌种处理的植株鲜重均显著低于其他处理方式，且效果最低（P<0.05）;与CK相比，木霉菌浸种处理显著提高了砧木幼苗的干重（P<0.05），增加了21.43%;木霉菌剂拌种处理显著提高了植株幼苗根的长度，使植株根长增加了6.1%。由此可知，使用木霉菌剂的处理能提高砧木幼苗的生长发育。
3 结论与讨论
在生物防治中，木霉菌作为一种重要的拮抗菌，对植物种子活力、幼苗根系活性、株高等都具有显著促进的作用[10]。本试验研究表明，与对照相比，木霉菌剂拌基质、浸种、拌种、喷施均能缩短黄瓜砧木种子的出土时间，其中喷施木霉菌液使种子出土时间和出齐时间达到了最短，分别为14.4h、52.8h，同时明显提高了种子出苗率。这个结果与赵晓燕等[11]做的室内种子萌发试验结果相似。此外，使用木霉菌剂处理的砧木幼苗在生长发育方面也存在差异，木霉菌剂拌基质和喷施处理的砧木幼苗株高明显增加，这与杨春林[12]利用哈茨木霉T-h-30对黄瓜植株的促生试验结果相类似。浸种处理显著提高了砧木幼苗的干重，拌种处理显著提高了植株幼苗根的长度。周晓馥等[13]研究发现黄瓜幼苗施加哈茨木霉后，植株的总根长、总根表面积、根尖数、分支数、总根体积、交叉数等根系各项指标均明显高于对照组植株。
参考文献
[1]张敏，郑磊，高旭利，等.不同南瓜砧木对根结线虫的抗性鉴定及其对接穗黄瓜生长的影响[J].山东农业科学，2020，52（06）：104-107.
[2]刘青，邹苑眉，郑略，等.黄瓜嫁接技术的优势及管理要点[J].现代园艺，2016（11）：75.
[3]吴乾兴，肖春雷，黄庆文.不同南瓜砧木嫁接对黄瓜生长、产量及蜡粉的影响[J].广东农业科学，2019，46（07）：32-37.
[4]胡娴，何珊，史红安，等.木霉菌应用研究进展[J].湖北工程学院学报，2019，39（06）：50-55.
[5]魏林.哈茨木霉（Trichoderma harzianum）发酵液中对豇豆具促生活性物质的研究[D].长沙：湖南农业大学，2005.
[6]朱衍杰.康宁霉素影响国槐种子萌发及幼苗生长的研究[D].聊城：聊城大学，2014.
[7]马赛，宋雨萌，罗兰.哈茨木霉菌对大白菜的促生作用及对根肿病的防治效果[J].山东农业科学，2020，52（05）：110-112.
[8]曲薇，伍淼，王旭东.哈茨木霉菌株WY-1对番茄的促生防病效果[J].江苏农业科学，2018，46（05）：94-96.
[9]刘畅，张欣玥，蔡汶妤，等.绿色木霉与哈茨木霉对黄瓜幼苗促生作用机理的研究[J].江苏农业科学，2020，48（16）：156-160.
[10]胡琼，邵菲菲.木霉对植物促生作用的研究进展[J].安徽农业科学，2010，38（10）：5077-5079.
[11]赵晓燕，周方园，吴晓青，等.耐盐耐高温木霉菌TW22657的分离鉴定及其对黄瓜抗菌促生作用[A]. 中国植物保护学会.中国植物保护学会2019年学术年会论文集[C].中国植物保护学会：中国植物保护学会，2019：1.
[12]杨春林，席亚东，刘波微，等.哈茨木霉T-h-30對几种蔬菜的促生作用及病害防治初探[J].西南农业学报，2008，21（06）：1603-1607.
[13]周晓馥，张欣玥，蔡汶妤，等.哈茨木霉对黄瓜幼苗促生作用的影响[J].吉林师范大学学报（自然科学版），2020，41（03）：93-99.
（责编：王慧晴）
关键词：木霉菌;使用方法;砧木种子;出苗率
中图分类号 S626 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2021）04-0046-03
Abstract： In order to study the effects of application methods of Trichoderma harzianumon on seedling emergenceand development of cucumber rootstock， we investigated the effects of 4 kinds of application methods of Trichoderma harzianum， namely mixing the substrate， seed dressing， soaking seed and spraying after planting， on seedling emergence time，total emergence time， emergence rate and seedling development， and cucumber rootstock seed， “Zhen Dali 1989”， and Trichoderma harzianumon spores were used as experimental materials. The results showed that all of four methods of Trichoderma harzianumon could shorten the emergence time of rootstock seeds， and among four treatment methods， the emergence time of cucumber rootstock seeds was the shortest time， up to14.4h， under the treatment of spraying the solution of Trichoderma harzianumon. Moreover， spraying the solution of Trichoderma harzianumon could significantly shorten the seedling emergence time of rootstock seeds， total emergence time being 52.8h; Meanwhile， spraying the solution of Trichoderma harzianumon also markedly enhanced the seedling emergence rate， up to 99.6%. Compared with the control， the treatment of mixing the substrate could significantly improve the height of seedlings， and the dry and fresh weight of the plant could be obviously increased by soaking seed treatment; however， seed dressing treatment remarkably promoted the growth of plant roots..
Key words： Trichoderma; Application method; Rootstock seed; Emergence rate
黃瓜（Cucumis sativus L.）属于葫芦科一年生蔓生草本植物 ，是我国主要的蔬菜品种之一[1]，深受大众喜爱。近年来，由于长期的连作障碍以及化学农药的不合理使用导致黄瓜病虫害发生愈发严重，从而使黄瓜产量品质严重下降。目前，黄瓜嫁接技术是提高黄瓜品质产量的有效途径[2]。而在嫁接技术中，砧木的选择及培育占有相当重要的地位[3]。
木霉菌（Trichoderma）属于真菌门，半知菌亚门，丝孢纲，丝孢目，粘孢菌类，广泛存在于植物及其残体、根际、土壤中，是典型的土壤和木材腐生真菌，同时也是土壤微生物的重要群落[4]。魏林[5]研究表明，哈茨木霉发酵液能够明显提高豆科种子发芽势促进种子的萌发，促进种子胚根和胚轴的生长，使种子具有比较高的活力指数。朱衍杰[6]研究表明，木霉提取物可以提高国槐种子的发芽率、发芽势、发芽指数，促进国槐种子胚根、胚芽的生长。而且有很多学者研究表明，哈茨木霉菌对大白菜番茄植株都具有良好的促生和防病作用[7-8]。刘畅等[9]研究发现单独施加绿色木霉和哈茨木霉处理的黄瓜幼苗的株高、茎粗、叶宽显著增加。
目前，对于木霉菌的促生作用，多数学者研究多关注于木霉菌的发酵液或提取物对植物种子萌发及生长的影响，而对于对于木霉菌固体孢子粉在种子萌发及育苗中的作用研究较少。因此，本研究以黄瓜砧木品种“砧大力1989”以及哈茨木霉菌DQ002固体孢子粉作为试验材料，探讨木霉菌菌剂的不同使用方法对种子出土时间、出齐时间及出苗率的影响，以及木霉菌剂使用方法对砧木幼苗生长的影响，为木霉菌剂有效应用于培育优质砧木种苗提供科学依据。 1 材料与方法
1.1 材料 供试砧木种子为“砧大力1989”，由青岛金妈妈农业科技有限公司提供。供试木霉菌为哈茨木霉DQ002固体孢子粉由黑龙江八一农垦大学园艺园林学院甜瓜课题组提供。
1.2 试验设计 试验在青岛金妈妈农业科技有限公司温室基地内进行，由青岛金妈妈农业科技有限公司提供的砧木品种作为试验材料，利用穴盘进行播种，所用初始基质为草炭∶蛭石∶珍珠岩=3∶1∶1配制的混合基质，播种前进行种子消毒并晾干，之后再进行试验。设定哈茨木霉菌以下处理：
T1：拌基质处理。按照木霉菌孢子粉∶育苗基质=1∶500（质量比）的比例混合均匀，之后将其分装于穴盘内，之后将种子播种于穴盘内;
T2：种子包衣处理。按照木霉菌孢子粉∶种子=1∶500（质量比）的比例混合均匀，进行拌种处理，之后播种于穴盘内，所用育苗基质未经木霉孢子粉处理;
T3：种子浸种处理。按照木霉菌孢子粉∶种子=1∶500（质量比）的比例，称取木霉菌孢子粉，并溶解于无菌水中，将种子于配制好的菌液中进行浸种8h，然后进行清洗，播种于穴盘内，所用育苗基质未经木霉孢子粉处理;
T4：播种后穴盘喷施。木霉菌菌液按照孢子粉∶水=1∶500（质量比）的比例进行配制。
CK：未进行木霉菌任何处理。清水浸泡种子8h，之后播种于穴盘内，所用育苗基质未经木霉孢子粉处理。
播种于50穴穴盘进行育苗。每个处理5次重复，25个穴盘。各个处理随机摆放，每12h进行1次调查，记录T1、T2、T3、T4 4种木霉菌处理的种子出苗率及出土时间;通过调查5用方式以及出苗15d后采集幼苗进行形态指标的测定。
1.3 测定项目 出土时间：开始出土～50%出土的时间;出齐时间：种子出土50%～90%出土的时间;植株高度、根系长度利用刻度尺进行测定;植株干鲜重利用天平进行测定。
1.4 数据统计与分析 所得数据均使用Microsoft Excel进行图表制作，利用统计软件SPSS20.0进行数据显著性分析。
2 结果与分析
2.1 木霉菌菌剂使用方式对种子出土时间、出齐时间及出苗率的影响 由表1可以得知，与对照（未进行木霉菌任何处理，CK）相比，拌基质、拌种、浸种和喷施4种木霉菌剂使用方式均能缩短砧木种子的出土时间，分别缩短了66.67%、30.0%，且4种处理方式中，播种后穴盘喷施木霉菌菌液促进砧木种子出土的时间最短，为14.4h;而且也能明显缩短砧木种子的齐苗时间，使齐苗时间缩短为52.8h，而对照处理砧木种子齐苗时间为64.8h;同时喷施木霉菌菌液使用方法明显提高了出苗率，达到99.6%。
2.2 木霉菌剂使用方式对砧木幼苗生长的影响 从表2可以看出，与对照（未进行木霉菌任何处理，CK）相比，木霉菌剂的4种处理方法都能显著提高砧木幼苗的株高、干重以及植株根长。其中木霉菌剂拌基质和喷施处理的砧木幼苗株高均显著高于对照（P<0.05），这2种处理的幼苗株高分别增加了13.90%和11.84%;在幼苗鲜重方面，拌种处理的植株鲜重均显著低于其他处理方式，且效果最低（P<0.05）;与CK相比，木霉菌浸种处理显著提高了砧木幼苗的干重（P<0.05），增加了21.43%;木霉菌剂拌种处理显著提高了植株幼苗根的长度，使植株根长增加了6.1%。由此可知，使用木霉菌剂的处理能提高砧木幼苗的生长发育。
3 结论与讨论
在生物防治中，木霉菌作为一种重要的拮抗菌，对植物种子活力、幼苗根系活性、株高等都具有显著促进的作用[10]。本试验研究表明，与对照相比，木霉菌剂拌基质、浸种、拌种、喷施均能缩短黄瓜砧木种子的出土时间，其中喷施木霉菌液使种子出土时间和出齐时间达到了最短，分别为14.4h、52.8h，同时明显提高了种子出苗率。这个结果与赵晓燕等[11]做的室内种子萌发试验结果相似。此外，使用木霉菌剂处理的砧木幼苗在生长发育方面也存在差异，木霉菌剂拌基质和喷施处理的砧木幼苗株高明显增加，这与杨春林[12]利用哈茨木霉T-h-30对黄瓜植株的促生试验结果相类似。浸种处理显著提高了砧木幼苗的干重，拌种处理显著提高了植株幼苗根的长度。周晓馥等[13]研究发现黄瓜幼苗施加哈茨木霉后，植株的总根长、总根表面积、根尖数、分支数、总根体积、交叉数等根系各项指标均明显高于对照组植株。
参考文献
[1]张敏，郑磊，高旭利，等.不同南瓜砧木对根结线虫的抗性鉴定及其对接穗黄瓜生长的影响[J].山东农业科学，2020，52（06）：104-107.
[2]刘青，邹苑眉，郑略，等.黄瓜嫁接技术的优势及管理要点[J].现代园艺，2016（11）：75.
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[4]胡娴，何珊，史红安，等.木霉菌应用研究进展[J].湖北工程学院学报，2019，39（06）：50-55.
[5]魏林.哈茨木霉（Trichoderma harzianum）发酵液中对豇豆具促生活性物质的研究[D].长沙：湖南农业大学，2005.
[6]朱衍杰.康宁霉素影响国槐种子萌发及幼苗生长的研究[D].聊城：聊城大学，2014.
[7]马赛，宋雨萌，罗兰.哈茨木霉菌对大白菜的促生作用及对根肿病的防治效果[J].山东农业科学，2020，52（05）：110-112.
[8]曲薇，伍淼，王旭东.哈茨木霉菌株WY-1对番茄的促生防病效果[J].江苏农业科学，2018，46（05）：94-96.
[9]刘畅，张欣玥，蔡汶妤，等.绿色木霉与哈茨木霉对黄瓜幼苗促生作用机理的研究[J].江苏农业科学，2020，48（16）：156-160.
[10]胡琼，邵菲菲.木霉对植物促生作用的研究进展[J].安徽农业科学，2010，38（10）：5077-5079.
[11]赵晓燕，周方园，吴晓青，等.耐盐耐高温木霉菌TW22657的分离鉴定及其对黄瓜抗菌促生作用[A]. 中国植物保护学会.中国植物保护学会2019年学术年会论文集[C].中国植物保护学会：中国植物保护学会，2019：1.
[12]杨春林，席亚东，刘波微，等.哈茨木霉T-h-30對几种蔬菜的促生作用及病害防治初探[J].西南农业学报，2008，21（06）：1603-1607.
[13]周晓馥，张欣玥，蔡汶妤，等.哈茨木霉对黄瓜幼苗促生作用的影响[J].吉林师范大学学报（自然科学版），2020，41（03）：93-99.
（责编：王慧晴）