巨噬细胞炎性反应蛋白3β复制缺陷型重组腺病毒的构建与鉴定

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目的构建小鼠巨噬细胞炎性反应因子-3β(mMIP3B)的复制缺陷型重组腺病毒(Ad-mMIP3β),并在体外表达MIP3β。方法通过在细菌BJ5183内同源重组,利用AdEasy^TM系统构建Ad—mMIP3β,经过噬斑筛选、PCR鉴定,然后用CsCl不连续密度梯度离心纯化。利用RT—PCR和Westernblot方法研究Ad-mMIP3β的体外表达情况。结果成功构建了MIP3β的复制缺陷型重组腺病毒,并检测到分泌到胞外的MIP3β蛋白。结论MIP3β的复制缺陷型重组腺病毒构建成功,为下一步的肿瘤基因治疗
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