【摘 要】
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目的:构建人组织激肽释放酶6原核表达系统。方法:采用RT-PCR技术从人乳腺癌组织中扩增出KLK6基因片段,克隆至原核表达载体pET28b中,经酶切和序列测定后,转化至E.coli BL21,IPTG
【基金项目】
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全军“十一五”面上项目,编号:06MA101
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目的:构建人组织激肽释放酶6原核表达系统。方法:采用RT-PCR技术从人乳腺癌组织中扩增出KLK6基因片段,克隆至原核表达载体pET28b中,经酶切和序列测定后,转化至E.coli BL21,IPTG进行诱导表达,表达产物经SDS-PAGE检测,Ni-NTA亲和层析柱纯化,其纯化产物进行SDS-PAGE和Western-blot检测。结果:pET28b-KLK6原核表达载体构建成功,经IPTG诱导高效表达hK6蛋白,纯化后获得大量高纯度蛋白。结论:成功构建了KLK6的原核表达系统并在E.coli BL21
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