【摘 要】
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采用同源转座方法,构建了在尿激酶原K区138-139位点插入了赖氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(KGD)序列的2种尿激酶原嵌合体基因(proUK-KGDW,proUK-KGDS),并以昆虫细胞SF9为宿主获得了高效表
【机 构】
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北京师范大学生命科学学院,军事医学科学院
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(30540071)
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采用同源转座方法,构建了在尿激酶原K区138-139位点插入了赖氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(KGD)序列的2种尿激酶原嵌合体基因(proUK-KGDW,proUK-KGDS),并以昆虫细胞SF9为宿主获得了高效表达,表达量在33.34μkat·mL^-1,细胞密度为10^6·mL^-1,表达高峰期表达产物占细胞总蛋白的15%以上.表达产物展示出较高的纤溶活性,并具有良好的人尿激酶原免疫原性,同时,经SDS-PAGE试验检测,昆虫细胞分泌的突变体相对分子质量符合理论预期,为5.4×
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