目的 观察不同剂量黄芪甲苷(astragalosideⅣ,ASTⅣ)对高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1 protein,HMGB1)介导小鼠调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)免疫功能的拮抗效应并探讨其药物作用机制. 方法 采用清洁级BALB/c小鼠,处死后分离脾脏CD4+ CD25+ Treg,在72孔板上按随机数字表法将Treg分为4组进行培养(每组18孔):(1)正常对照组:单纯Treg; (2) HMGB1组:HMGB1(1μg/ml)+Treg;(3)HMGB1+ ASTⅣ治疗Ⅰ组:HMGB1(1 μg/ml)+ASTⅣ(50μg/ml)+Treg；(4) HMGB1+ ASTⅣ治疗Ⅱ组:HMGB1(1μg/ml)+ASTⅣ(100 μg/ml)+Treg.以上4组再各分为3个亚组(每组6孔),分别于HMGB1刺激后24,48,72 h收集Treg.采用流式细胞仪及荧光定量PCR法检测Treg胞内叉头翼状螺旋转录因子p3(Foxp3)蛋白和基因表达水平,ELISA法检测Treg细胞孵育上清液中IL-10及TGF-β分泌水平. 结果 HMGB1刺激Treg后,Foxp3蛋白及基因表达水平在24 ～72 h均较对照组有所下降(P＜0.01),其中以作用72 h下调尤为明显,细胞培养上清中IL-10及TGF-β水平呈现与Foxp3相同的变化趋势；而ASTⅣ治疗组Foxp3蛋白及基因表达水平在给药后24～72 h均较HMGB1组明显升高(P＜0.05),且HMGB1+ASTⅣ治疗Ⅱ组Foxp3蛋白及基因表达水平在给药后24 ～ 72 h明显高于HMGB1+ ASTⅣ治疗Ⅰ组(P＜0.05),细胞培养上清中IL-10及TGF-β水平亦呈现与Foxp3相同的变化趋势.结论 不同剂量ASTⅣ在体外均可拮抗HMGB1对小鼠Treg免疫功能的影响,呈剂量依赖性,提示其对HMGB1介导的促炎效应具有显著抑制作用。
黄芪甲苷对高迁移率族蛋白B1介导小鼠调节性T细胞免疫功能的拮抗作用
【摘 要】
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目的 观察不同剂量黄芪甲苷(astragalosideⅣ,ASTⅣ)对高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1 protein,HMGB1)介导小鼠调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)免疫功能的拮抗效应并探讨其药物作用机制. 方法 采用清洁级BALB/c小鼠,处死后分离脾脏CD4+ CD25+ Treg,在72孔板上按随机数字表法将Treg分
【机 构】
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100020北京,首都医科大学附属北京朝阳医院妇产科,解放军总医院第一附属医院全军烧伤研究所,100020北京,首都医科大学附属北京朝阳医院SICU,首都医科大学附属北京友谊医院感染暨急救医学科,10
【出 处】
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中华创伤杂志
【发表日期】
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2013年29期
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