王枣子总黄酮对佐剂性关节炎大鼠的治疗作用及机制研究

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目的研究王枣子中总黄酮(TFIA)对佐剂性关节炎(AA)的治疗作用及机制。方法采用注射完全弗氏佐剂制备AA模型大鼠后随机分为4组:AA组、AA+TFIA 50mg/kg组、AA+TFIA 100mg/kg组、AA+TFIA 150mg/kg组,每组10只。另设空白对照组大鼠,不造模(n=10)。造模后4d,TFIA各剂量组大鼠采用TFIA灌胃治疗,分别按上述3个剂量灌胃,每天1次,共24d,空白对照组和AA组灌胃生理盐水。治疗第12天、16天、20天、24天采用大鼠关节炎评分法评价TFIA对AA大鼠的治疗作用。治疗第24天处死各组大鼠,分离大鼠滑膜组织,原代培养各组大鼠成纤维样滑膜细胞(FLS),ELISA检测各组FLS中白细胞介素(IL-1)表达,MTT检测各组FLS增殖活力,real time qPCR检测各组FLS miR-152和经典Wnt信号通路关键基因[β-catenin、细胞周期蛋白基因(ccnd1)]表达。向AA大鼠FLS转染miR-152mimics和对照NC mimics,向TFIA 100mg/kg剂量组大鼠FLS转染miR-152inhibitors和对照NC inhibitors,36h后检测miR-152、β-catenin、ccnd1、IL-1表达和FLS的增殖。结果 TFIA各剂量灌胃治疗均能抑制AA大鼠关节炎评分,抑制β-catenin、ccnd1、IL-1表达和FLS增殖活力(P<0.05),各剂量组间比较差异无统计学意义(P>0.05),与空白对照组相比,各剂量组均未恢复至正常水平(P<0.05)。与空白对照组相比,AA组FLS中miR-152表达降低(P<0.05),向AA组FLS转染miR-152mimics后,与对照组相比,过表达的miR-152抑制β-catenin、ccnd1、IL-1表达,抑制FLS增殖(P<0.05)。向TFIA100mg/kg剂量组FLS转染miR-152inhibitors,与对照组相比,抑制了miR-152的表达,促进了β-catenin、ccnd1、IL-1表达,促进了FLS增殖(P<0.05)。结论 TFIA对AA大鼠有一定治疗作用,此作用可能通过上调miR-152的表达,影响经典Wnt信号通路实现。
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