大胞饮途径介导血管平滑肌细胞内脂滴聚集

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目的探讨大胞饮途径是否介导血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)内脂滴聚集。方法组织块贴壁培养法培养VSMCs;免疫荧光染色鉴定原代VSMCs;天然低密度脂蛋白(nLDL,50、200、800μg/mL)及脂多糖(LPS,200 ng/mL)刺激培养VSMCs,构建泡沫细胞模型;流式细胞术检测VSMCs对大胞饮示踪剂Lucifer Yellow(LY)和Di I标记的nLDL(Di I-nLDL)的摄取;油红O染色鉴定VSMCs内脂滴聚集。结果 (1)LPS刺激可促进VSMCs对nLDL呈浓度依赖性地摄取增加,导致细胞内脂滴的聚集逐渐增多。(2)200 ng/mL LPS刺激VSMCs 6 h,VSMCs对LY的摄取增加75%(P<0.01),对Di I-nLDL的摄取增加76%(P<0.01)。(3)应用胞饮抑制剂LY294002后,VSMCs对Di I-nLDL的摄取减少约29%(P<0.01),VSMCs内脂滴聚集明显减少。结论 LPS刺激诱导VSMCs通过大胞饮途径摄取nLDL,从而增加细胞内脂滴的聚集,促进平滑肌源性泡沫细胞形成。
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