【摘 要】
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目的 观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对原代培养大鼠腹膜间皮细胞(RPMC)Toll样受体4(TLR4)表达的影响及其在脂多糖(LPS)诱导的核转录因子κB(NF-κB)活化及CD40表达中的作用.方法
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目的 观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对原代培养大鼠腹膜间皮细胞(RPMC)Toll样受体4(TLR4)表达的影响及其在脂多糖(LPS)诱导的核转录因子κB(NF-κB)活化及CD40表达中的作用.方法 分离及培养RPMC.用不同浓度AngⅡ(10-9、10-8、10-7、10-6mol/L)刺激细胞及用10-7mol/L AngⅡ刺激细胞不同时间(mRNA为1、2、4、8、12、24、48 h和蛋白为6、12、24、36、48 h),观察血管紧张素1型受体(ATIR)阻滞剂洛沙坦(10-5mol/L)和血管紧张素2型受体(AT2R)阻滞剂PDl23177(10-5mol/L)对AngⅡ诱导TLR4表达的影响.将细胞随机分为下列4组:对照组、Ang Ⅱ(10-7mol/L)组、LPS(1 mg/L)组、Ang Ⅱ(10-7mol/L)+LPS(1 mg/L)组.观察Ang Ⅱ对LPS诱导的NF-κB激活和CD40表达的影响.RT-PCR检测TLR4、CD40mRNA表达;Western印迹检测TLR4、IκBα、磷酸化IκBα(P-IκBα)、NF-κB p65、磷酸化NF-κB(p-p65)蛋白表达;免疫荧光检测细胞NF-κB p65亚单位的表达及分布.结果 (1)10-9、10-8、10-7、10-6mol/L Ang Ⅱ作用RPMC 12 h,TLR4 mRNA表达分别增加70.5%、89.5%、102.9%和121.9%;作用24 h TLR4蛋白表达分别增加12.1%、27.7%、51.2%和41.6%.AngⅡ(10-7mol/L)作用RPMC不同时问,TLR4 mRNA表达高峰为8 h和12 h(P(0.01),蛋白表达高峰为12 h和24 h(P
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