【摘 要】
：
目的 探讨微小RNA(miR)-335-3p对骨髓瘤细胞增殖和凋亡的影响及作用机制.方法 2018年5月至2019年1月,培养正常骨髓细胞MNC和骨髓瘤细胞KM3和U266,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞中miR-335-3p表达水平.将KM3细胞分为miR-NC组(转染模拟对照序列)、miR-335-3p组[转染miR-335-3p模拟物(miR-335-3p mimics)]、pcDNA3.1+miR-335-3p组(共转染空载体和miR-335-3p mimics)和pcD
【机 构】
：
十堰市太和医院骨一科,湖北 十堰442000
论文部分内容阅读
目的 探讨微小RNA(miR)-335-3p对骨髓瘤细胞增殖和凋亡的影响及作用机制.方法 2018年5月至2019年1月,培养正常骨髓细胞MNC和骨髓瘤细胞KM3和U266,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞中miR-335-3p表达水平.将KM3细胞分为miR-NC组(转染模拟对照序列)、miR-335-3p组[转染miR-335-3p模拟物(miR-335-3p mimics)]、pcDNA3.1+miR-335-3p组(共转染空载体和miR-335-3p mimics)和pcDNA3.1-MDM2+miR-335-3p组[共转染小鼠双微体基因(MDM2)过表达载体和miR-335-3p mimics],MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡的影响,蛋白质印迹法(Western blotting)检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(P21)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白和Bcl-2相关X(Bax)蛋白表达.双荧光素酶报告基因实验验证KM3细胞中miR-335-3p与MDM2调控关系.结果 骨髓瘤细胞KM3和U266中miR-335-3p表达水平分别为0.24±0.01、0.38±0.02,显著低于正常骨髓细胞MNC中的miR-335-3p表达水平0.77±0.03(均P<0.05).与miR-NC组比较,miR-335-3p组KM3细胞吸光度[48 h:(0.60±0.03)比(0.99±0.06);72 h:(0.82±0.05)比(1.67±0.07)]、细胞中cyclin D1和Bcl-2蛋白表达均降低(均P<0.05),细胞凋亡率[(24.31±0.99)％比(8.13±0.83)％]、细胞中P21和Bax蛋白表达均升高(均P<0.05).miR-335-3p在KM3细胞中负调控MDM2表达.与pcDNA3.1+miR-335-3p组比较,pcDNA3.1-MDM2+miR-335-3p组KM3细胞吸光度[48 h:(0.80±0.05)比(0.63±0.04);72 h:(1.28±0.06)比(0.88±0.05)]、细胞中cyclin D1和Bcl-2蛋白表达均升高(均P<0.05),凋亡率[(15.34±0.66)％比(23.98±1.41)％]、细胞中P21、Bax蛋白表达均降低(均P<0.05).结论 miR-335-3p可能通过下调MDM2表达抑制骨髓瘤细胞的增殖,并诱导细胞凋亡.
其他文献
目的 探讨妊娠高血压妇女尿蛋白/肌酐比值(urine albumin creatinine ratio,ACR)、血浆D-二聚体水平与不良妊娠结局的关系.方法 选取2015年7月至2018年2月北京市通州区妇幼保健院确诊的妊娠高血压妇女97例进行回顾性研究,根据其妊娠结局分为不良组59例、未出现不良妊娠结局妇女38例(对照组);对比分析两组孕晚期的ACR值、血浆D-二聚体、血压、降压药物应用史、孕次、产次、孕前体质量指数(BMI)等资料,采用logistic回归分析法探讨ACR值、D-二聚体值对妊娠高血压
目的 观察肺超声评分对坠积性肺炎病人病情评估的应用价值.方法 选取2018年2月至2019年3月在海南医学院第一附属医院接受治疗的坠积性肺炎病人100例为研究对象,其中非重症组65例,重症组35例;同时选取同期在该院体检的健康成年人50例作为对照组.比较三组肺超声评分、血气指标[经皮动脉血氧饱和度(SpO2)、动脉血二氧化碳分压(PaCO2)]、炎性因子[超敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)]和肺功能指标[用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积(FE
目的 探讨胃癌病人手术前血清标志物癌胚抗原、糖类抗原125(CA125)、糖类抗原19-9(CA19-9)表达与人表皮生长因子受体2(HER-2)和Ki-67蛋白表达水平相关性以及与临床病理特征之间的关系.方法 首先收取132例自2017年10月至2018年12月来安徽医科大学第一附属医院高新院区住院治疗的胃癌手术病人的术前血液标本和肿瘤组织标本,然后用免疫法检测胃癌病人术前血清标志物癌胚抗原,CA125,CA19-9的表达情况,用免疫组织化学Elivision法检测同一病人术后肿瘤组织HER-2和Ki-
目的 建立甘露醇注射液一致性评价有关物质研究方法.方法 采用高效液相色谱法,RID检测器,强阳离子钙型交换柱(300 mm×7.8 mm),流动相:超纯水,流速为0.5 mL/min,柱温为80℃,检测器温度为40℃.结果 3种已知杂质和甘露醇均能得到有效分离;甘露醇、杂质A、B和C分别在4.32～2003.83 mg/L、5.12～1981.77 mg/L、4.11～1982.61 mg/L和6.92～1947.46 mg/L范围内线性关系良好,r均为1.杂质A、B、C平均回收率分别为102.62％、1