【摘 要】
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目的 观察microRNA-21 (miR-21)在碱烧伤诱导小鼠角膜新生血管(CorNV)模型中的变化规律及其与血管内皮生长因子-A(VEGF-A)的关系.方法 实验研究.68只BALB/c小鼠,右眼制备碱烧
【机 构】
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200233,上海交通大学附属第六人民医院眼科200052,上海市光华中西医结合医院眼科;200072,上海市第十人民医院眼科;
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目的 观察microRNA-21 (miR-21)在碱烧伤诱导小鼠角膜新生血管(CorNV)模型中的变化规律及其与血管内皮生长因子-A(VEGF-A)的关系.方法 实验研究.68只BALB/c小鼠,右眼制备碱烧伤诱导CorNV模型作为实验组,左眼作为正常对照组不予任何处理.碱烧伤后第4、7、14、21、28天行眼前节照相测量CorNV面积.分别在碱烧伤后第4、7、14、28天分别随机处死3只小鼠取眼球制石蜡切片,通过苏木素-伊红(HE)染色观察角膜的组织病理学改变,免疫组织化学(IHC)染色检测角膜VEGF-A表达;各时间点随机处死14只小鼠行实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测角膜miR-21及VEGF-A mRNA的表达.数据分析采用单因素方差分析、配对样本t检验、直线相关分析.结果 小鼠CorNV于碱烧伤后第4天开始出现,14天时生长达高峰,21天后逐渐消退.HE染色显示实验组角膜第14天呈现较多粗大CorNV,28天时明显减少.同期IHC染色显示实验组角膜在第4、7、14天时VEGF-A阳性表达均高于对照组(t=19.47、61.86、44.18,P＜0.05),28天时差异无统计学意义(t=2.52,P＞0.05).实验组第7天时角膜VEGF-A阳性表达明显,14天后表达相对减弱,差异具有统计学意义(F=649.4,P＜0.05).实验组角膜在第4、7、14、28天时miR-21表达均高于对照组(t=4.60、14.74、9.78、5.69,P＜0.01);VEGF-A mRNA实验组角膜在第4、7、14天时高于对照组(t=5.82、14.11、3.41,P＜0.05),28天时差异无统计学意义(t=0.76,P＞0.05);且两者表达均于第7天时达高峰,差异均具有统计学意义(F=62.1、64.5,P＜0.05).miR-21与VEGF-A mRNA及其蛋白表达均呈正相关(r=0.62、0.66,P＜0.05).结论 碱烧伤诱导小鼠角膜CorNV形成中miR-21、VEGF-A表达均升高,且miR-21、VEGF-A mRNA和蛋白表达高峰较CorNV形成高峰早,提示miR-21可能通过VEGF信号通路参与CorNV形成.
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