【摘 要】
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目的:通过悬浮适应,使中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)获得悬浮生长的特性,并可在悬浮培养条件下较快地生长。方法:将CHO细胞以3×105/mL接种于100mL的三角瓶内,培养时加入1%小牛
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(2004AA2Z3792)
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目的:通过悬浮适应,使中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)获得悬浮生长的特性,并可在悬浮培养条件下较快地生长。方法:将CHO细胞以3×105/mL接种于100mL的三角瓶内,培养时加入1%小牛血清、1g/LPluronic F-68、25μg/mL硫酸葡聚糖,培养体积35mL,摇床转速90r/min,每24h离心换液,当细胞增殖为2×106/mL时传代。结果:经过悬浮适应,细胞的平均比生长速率由适应最初的0.27/d提高为适应后的0.48/d,最大总细胞密度由适应初期的2.5×106/mL提高为适应后的6.3×106/mL,目的蛋白活性也由适应前的2781U/mL提高为适应后的8878U/mL,适应后细胞的葡萄糖平均比消耗率为1.42μmol/(106细胞·d),低于适应前的2.16μmol/(106细胞·d)。结论:贴壁生长的CHO细胞经过悬浮适应,不仅可以在悬浮培养条件下快速生长,而且细胞对葡萄糖的利用率也得到提高。
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