【摘 要】
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目的建立一种简单的慢病毒载体介导的同时沉默双基因的方法。方法该研究在慢病毒载体的3＇LTR区同时插入沉默两个基因p18和MAD1的shRNA（Small hairpin RNA）,通过包装细胞293T和包
【机 构】
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湖南省株洲市一医院血液科,贵州大学生命科学学院,贵州省人民医院中心实验室
【基金项目】
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贵州大学研究生创新基金(校研农2009020);贵州省国际科技合作计划(黔科合外G字[2009]700103号);贵州大学人才引进科研项目(贵大人基合字(2007)033号)资助
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目的建立一种简单的慢病毒载体介导的同时沉默双基因的方法。方法该研究在慢病毒载体的3＇LTR区同时插入沉默两个基因p18和MAD1的shRNA（Small hairpin RNA）,通过包装细胞293T和包装质粒包装成假病毒颗粒,感染NIH/3T3细胞。其沉默基因的效果用Western blotting来检测。结果载体构建成功,被感染的NIH3T3细胞中,p18和MAD1基因的蛋白表达被显著抑制。结论该载体构建方法操作简单,无需PCR,及多次连接反应,且可达到两种基因同时被稳定、高效沉默的目的,为相关研究提
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