人A组轮状病毒地方株外壳蛋白VP4的原核表达

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目的:制备轮状病毒外壳蛋白VP4。方法:从病人粪便中分离的毒株中提取病毒dsRNA为模板,经RT—PCR获得编码VP4截短蛋白基因片段cDNA(1—1253bp),将VP4基因片段克隆于pGEX-4T-2融合表达载体中,经dot印迹筛出阳性重组子,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)。工程菌经IPTG诱导,11%聚丙烯酰胺凝胶电泳。结果:Western印迹分析表明,工程菌能正确表达VP4蛋白片段,且具有良好的抗原性。结论:为研制轮状病毒重组疫苗、亚单组疫苗、转基因植物口服疫苗做了前期准备。
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