【摘 要】
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目的探讨Ⅱ型登革病毒(DENV-2)感染的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells，HUVECs)与CD4＋T细胞的共培养对HUVECs表达细胞间黏附分子(ICAM-1)、血管细胞黏附分子(VCAM-1) mRNA和CD4＋T细胞表达IL-10、TGF-β1 mRNA产生的影响，以进一步了解DENV感染的免疫学机制。方法S1P1选择性激动剂CY
【机 构】
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550000 贵阳，贵州医科大学基础医学院免疫学教研室,550000 贵阳，贵州医科大学基础医学院免疫学教研室,550000 贵阳，贵州医科大学基础医学院免疫学教研室,550000 贵阳，贵州医科大学
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目的探讨Ⅱ型登革病毒(DENV-2)感染的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells，HUVECs)与CD4＋T细胞的共培养对HUVECs表达细胞间黏附分子(ICAM-1)、血管细胞黏附分子(VCAM-1) mRNA和CD4＋T细胞表达IL-10、TGF-β1 mRNA产生的影响，以进一步了解DENV感染的免疫学机制。
方法S1P1选择性激动剂CYM-5442处理HUVECs 24 h，用103半数组织培养感染剂量(TCID50)的DENV-2感染HUVECs后与人CD4＋T细胞共培养。于4、8、12、24、48及72 h，分别收集细胞样本，用real-time PCR检测DENV-2非结构蛋白1(NS1)、鞘氨醇激酶1(SPHK1)、ICAM-1、VCAM-1、IL-10、TGF-β1 mRNA表达变化。
结果HUVECs被DENV-2感染后，病毒NS1 mRNA的表达呈一定时效性，在24 h达到高峰。在DENV-2感染的不同实验组中，CYM-5442处理和未处理组，DENV-2 NS1 mRNA的表达均无明显差异。HUVECs被CYM-5442处理和DENV-2感染后，SPHK1 mRNA表达明显上升，差异有统计学意义(P<0.05)；在DENV-2感染的HUVECs与CD4＋T细胞共培养的情况下，HUVECs ICAM-1和VCAM-1 mRNA高表达，相对HUVECs仅被DENV-2感染组和未处理组差异有统计学意义(P<0.01)，CD4＋T细胞TGF-β1 mRNA表达无明显差异，IL-10 mRNA表达上调，差异有统计学意义(P<0.05)。
结论实验证明DENV-2能在HUVECs内复制增殖，CD4＋T细胞可抑制DENV-2增殖；CD4＋T细胞对DENV-2感染的HUVECs产生黏附分子VCAM-1和ICAM-1有明显的促进作用，CD4＋T细胞可促使HUVECs活化，增强炎症反应，这可能与DENV-2感染诱发血管通透性升高有关。DENV-2感染的HUVECs对CD4＋T细胞IL-10 mRNA表达有一定上调作用，对TGF-β1的表达没有明显的影响。
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