Sephadex LH-20凝胶层析结合液相制备色谱分离纯化大豆皂苷单体

来源 :中国食品学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cklingdian
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为建立大豆皂苷单体的分离纯化方法,采用70%乙醇浸提法提取脱脂大豆胚芽中大豆皂苷粗提物;利用葡聚糖凝胶色谱法,以甲醇为洗脱溶剂,洗脱速度3mL/min,进样量60mg大豆皂苷粗提物,分离大豆皂苷和异黄酮,得到高纯度的总大豆皂苷;以总大豆皂苷为原料,优化制备型HPLC流动相、洗脱程序、进样量等条件,最终采用流动相A:水,B:0.01%TFA-乙腈,流速为10mL/min,进样量70mg,分离大豆皂苷单体。采用UPLC-MS鉴定各类皂苷单体,制备得到9种高纯度大豆皂苷单体,分别为ac3-Ab、Aa、Ab、Ae、Af、Bb、Be、Ba、Bb′,纯度在99%以上的有ac3-Ab、Aa、Ab、Bb大豆皂苷,其余纯度为90%以上。DDMP类皂苷因其极不稳定,得到纯度较低的αg、βg、γg大豆皂苷。本方法能有效地分离大豆胚芽中的A组、B组和DDMP组大豆皂苷。
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