【摘 要】
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目的 探讨细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路与醛糖还原酶(AR)在非高糖条件下对转化生长因子(TCF)β1诱导人系膜细胞(HMC)细胞外基质成分纤连蛋白(FN)表达的影响.方法 应用醛
【机 构】
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贵州省人民医院病理科,山东省烟台市烟台山医院病理科,复旦大学上海医学院病理系
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目的 探讨细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路与醛糖还原酶(AR)在非高糖条件下对转化生长因子(TCF)β1诱导人系膜细胞(HMC)细胞外基质成分纤连蛋白(FN)表达的影响.方法 应用醛糖还原酶抑制剂(ARI)、ERK信号通路抑制剂U0126、转染pCDNA3-AR及AR-siRNA分别作用于HMC后,再用TGF-β1刺激,观察刺激前后HMC表达FN的情况.Western印迹检测HMC内FN和AR的变化,实时定量PCR鉴定转染和干扰效果.结果 HMC在TGF-β1作用后,AR、FN和磷酸化ERK(p-ERK)蛋白表达升高,与对照组比较,分别升高了1.8、1.9倍(均P＜0.05)和5.1倍(P＜0.01).使用ARI孵育后,再用TGF-β1刺激,与单独使用TGF-β1刺激组比较,FN蛋白表达量约为对照组的30%(P＜0.01);用ERK信号通路抑制剂后,再用TGF-β1刺激,FN蛋白表达量约为对照组的10%(P＜0.01);转染pCDNA3-AR后,HMC中AR mRNA表达增多,为对照组10倍以上(P＜0.01),FN蛋白表达增加到对照组的2.5倍(P＜0.05),再用TGF-β1刺激,FN蛋白表达增加到对照组的3.6倍(P＜0.05);转染AR-siRNA后,HNC中AR mRNA表达减少,干扰效率大于80%(P＜0.01),AR、FN及p-ERK蛋白表达减少,分别约为对照组的20%、24%、7%(均P＜0.01),再用TGF-β1刺激,FN蛋白表达仍然减少,为对照组的25%(P＜0.01).结论 AR基因参与TGF-β1诱导的HMC细胞外基质表达过程的调控,在肾小球硬化过程中起一定作用,且这一过程与ERK信号通路的活化有关.
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