【摘 要】
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目的 分析基于无翅型MMTV整合位点家族(Wnt)/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路,血管内皮生长因子(VEGF)基因转染骨髓源内皮祖细胞(EPCs)移植对大鼠缺血皮瓣的治疗作用.方法 培养诱导分化大鼠EPCs,脂质体介导VEGF转染EPCs.Wistar大鼠制备缺血皮瓣模型分为对照组、VEGF-EPCs组、NC-EPCs组、Wnt/β-catenin信号通路激活剂氯化锂(LiCl)组.VEGF-EPCs组与NC-EPCs组皮瓣分别注射PcDNA3.1(+)/VEGF165质粒、PcDNA3.1
【机 构】
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宁波市第六医院手外科,浙江宁波 315040;中山大学附属第一医院脊柱外科,广东广州 510000
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目的 分析基于无翅型MMTV整合位点家族(Wnt)/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路,血管内皮生长因子(VEGF)基因转染骨髓源内皮祖细胞(EPCs)移植对大鼠缺血皮瓣的治疗作用.方法 培养诱导分化大鼠EPCs,脂质体介导VEGF转染EPCs.Wistar大鼠制备缺血皮瓣模型分为对照组、VEGF-EPCs组、NC-EPCs组、Wnt/β-catenin信号通路激活剂氯化锂(LiCl)组.VEGF-EPCs组与NC-EPCs组皮瓣分别注射PcDNA3.1(+)/VEGF165质粒、PcDNA3.1(+)/NC空载对照质粒,对照组注射PBS溶液,LiCl组注射LiCl.酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清VEGF水平;观察大鼠皮瓣存活情况;激光多普勒血液检测仪检测皮瓣蒂部血流;HE染色计算皮瓣毛细血管密度;Western blotting检测皮瓣组织Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达.结果 镜下观察分离培养的EPCs外观呈“铺路石”状,经鉴定符合EPCs表面抗原.VEGF-EPCs组、NC-EPCs组、LiCl组血清VEGF水平、皮瓣存活率、PU值、毛细血管密度高于对照组,且VEGF-EPCs组高于NC-EPCs组、LiCl组,差异有统计学意义(P0.05).VEGF-EPCs组、NC-EPCs组、LiCl组β-catenin、c-myc蛋白相对表达量高于对照组,LiCl组高于VEGF-EPCs组与NC-EPCs组,VEGF-EPCs组高于NC-EPCs组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 VEGF基因转染骨髓源EPCs移植能促进大鼠缺血皮瓣的存活,改善血液循环,增加微血管密度,其机制与Wnt/β-catenin信号通路的激活有关.
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