靶向人白细胞介素17受体C的特异性shRNA表达载体的构建及鉴定

来源 :中华关节外科杂志（电子版） | 被引量 : 0次 | 上传用户：passionzy

【摘要】

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目的构建同时靶向人白细胞介素17受体C（IL-17RC）的小发夹状干扰RNA（shRNA）真核表达载体。方法设计并合成针对人IL-17RC cDNA的寡聚DNA引物，退火并连接至载体pGenesil-1，将重组质粒

【作者】

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李永忠胡大军李欣林华陈贤梅陈亮

【机构】

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湖北省宜昌市第二人民医院骨科,武汉大学人民医院骨外科

【出处】

：

中华关节外科杂志（电子版）

【发表日期】

：

2009年5期

【关键词】

：

细胞介素17受体C 小发夹状干扰RNA 骨关节炎 IL-17RC Short hairpin interference RNA （shRNA） Osteoart

【基金项目】

：

基金项目：宜昌市科技攻关项目（JX1BO74）

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目的构建同时靶向人白细胞介素17受体C（IL-17RC）的小发夹状干扰RNA（shRNA）真核表达载体。方法设计并合成针对人IL-17RC cDNA的寡聚DNA引物，退火并连接至载体pGenesil-1，将重组质粒转染至293T细胞，提取转染或未转染293T细胞的mRNA，逆转录成cDNA，经荧光定量PCR检测细胞IL-17RC基因表达水平，最后用流式细胞仪检测转染阳性细胞表面IL-17RC的表达。结果1．限制性酶切和测序结果表明成功构建了人IL-17RC的特异性shRNA真核表达载体shRNA—IL-1

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