【摘 要】
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[目的]观察黄芪三仙汤抗绝经后骨质疏松症(PMOP)的作用机制.[方法]体内研究:采用去势法建立绝经后骨质疏松大鼠模型.测量大鼠股骨骨密度,进行骨组织形态学观察及骨小梁形态计量学测定,采用蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测骨组织磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)1/蛋白激酶B(Akt)1、p-Akt2/Akt2、雌激素受体α(ERα)蛋白表达.体外研究:原代培养PMOP成骨细胞.分别采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)、碱性磷酸酶染色法和茜素红染色法观察黄芪三仙汤血清对PMOP成骨细胞增殖、分化和矿
【机 构】
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广东医科大学,广东东莞 523808
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[目的]观察黄芪三仙汤抗绝经后骨质疏松症(PMOP)的作用机制.[方法]体内研究:采用去势法建立绝经后骨质疏松大鼠模型.测量大鼠股骨骨密度,进行骨组织形态学观察及骨小梁形态计量学测定,采用蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测骨组织磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)1/蛋白激酶B(Akt)1、p-Akt2/Akt2、雌激素受体α(ERα)蛋白表达.体外研究:原代培养PMOP成骨细胞.分别采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)、碱性磷酸酶染色法和茜素红染色法观察黄芪三仙汤血清对PMOP成骨细胞增殖、分化和矿化的影响,采用Western Blot法检测成骨细胞p-Akt1/Akt1、p-Akt2/Akt2、ERα及成骨分化相关标志物包括Runt相关转录因子2(Runx2)、成骨细胞特异性转录因子Osterix(Osx)、骨桥蛋白(OPN)等的蛋白表达.[结果]与模型组比较,黄芪三仙汤组大鼠骨小梁断裂、缺失情况均得到改善,骨密度升高,骨小梁数量增加、面积增大、分离度减小,骨组织p-Akt1/Akt1、p-Akt2/Akt2和ERα蛋白表达水平升高(P<0.05).与正常血清组比较,黄芪三仙汤血清组PMOP成骨细胞数量增加,碱性磷酸酶活性增强,矿化结节增多,p-Akt1/Akt1、p-Akt2/Akt2和ERα以及Runx2、Osx、OPN蛋白表达水平升高(P<0.05),而加入PI3K/Akt抑制剂LY294002后,翻转了黄芪三仙汤血清对PMOP成骨细胞碱性磷酸酶活性及Runx2、Osx、OPN表达的促进作用.[结论]黄芪三仙汤通过抑制PI3K/Akt信号通路活化起到抗PMOP的作用.
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