人胃癌组织定向cDNA文库的构建

来源 :中国临床新医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ynzhengda
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目的快速构建成人胃癌组织cDNA文库。方法从人胃癌组织分离总RNA,以含有轴IB酶切位点的oligo(dT)引物合成第1链cDNA,以含蛳IA酶切位点的SMART寡核苷酸为引物经LD-PCR扩增双链cDNA,双链cDNA经sGI(IA&IB)酶切,以CHROMA SPIN+TE-1000柱分级分离cDNA,收集符合需要的cDNA片段并纯化,随后将之与λTriplEx2载体连接经体外包装成噬菌体λ文库。结果经检测共获得2.73×10^6个重组子,重组率约为94%,插入片段大小平均为1.2kb。结论
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