TMV和PVY外壳蛋白双基因融合干涉及烟草转化

来源 :基因组学与应用生物学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Leichenglin8888
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为了降低烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)和马铃薯Y病毒(potato irus Y,PVY)复合侵染对烟草带来的危害,本实验找到TMV—CP和PVY—CP基因部分保守序列,将保守序列进行双基因融合,此双基因即为RNAi的靶序列,用限制性内切酶将双基因从pMD18-T载体上切下,正反向连接到pUCCRNAi载体后,经酶切鉴定后定向连接到含超强启动子的pC2300—35S—OCS表达载体上,利用冻融法将此表达载体导入只含辅助质粒的根癌农杆菌中,构建含靶序列反向重复结构的RNAi
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