抗CD3基因工程嵌合抗体片段Fab′的构建、表达和活性测定

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【摘要】

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PCR扩增抗CD3单抗轻链可变区(VL)和重链可变(VH)片段基因,将其重组到Fab ′表达载体中,构建成抗CD3嵌合抗体Fab′表达载体,转化大肠杆菌16C9进行可溶性表达 . 产物经蛋白G亲

【作者】

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徐晨熊冬生许元富彭晖邵晓枫朱祯平杨纯正

【机构】

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中国医学科学院,中国协和医科大学,血液学研究所,实验血液学国家重点实验室,天津,300020

【出处】

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高技术通讯

【发表日期】

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2000年7期

【关键词】

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基因抗体工程 Fab′ 嵌合 CD3

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PCR扩增抗CD3单抗轻链可变区(VL)和重链可变(VH)片段基因,将其重组到Fab ′表达载体中,构建成抗CD3嵌合抗体Fab′表达载体,转化大肠杆菌16C9进行可溶性表达 . 产物经蛋白G亲和层析柱纯化.免疫荧光竞争结合实验和3H掺入实验证实能与小鼠抗CD3 IgG HIT3a竞争性结合表达CD3的T淋巴细胞,并促进细胞增殖.

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