淋巴细胞功能相关抗原-1/细胞间黏附分子-1介导的细胞因子诱导的杀伤细胞体外抑瘤机制

来源 :白血病淋巴瘤 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tianledaishumama
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目的 探讨淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)/细胞间黏附分子-1(ICAM-1)介导的细胞因子诱导杀伤细胞(CIK)的体外抑瘤机制。方法从白血病患儿外周血分离淋巴细胞,经过干扰素-y(IFN-1)、抗CD,单克隆抗体(CD,McAb)、白细胞介素-2(IL-2)诱导并与树突状细胞(DC)共培养,获得大量的DC—CIK。在经10、20μg/ml等不同质量浓度小鼠抗人I.FA一1单克隆抗体处理后,采用Mrrr法研究DC—CIK细胞对多种白血病细胞株的杀伤活性,RT—PCR与Westernblotting方法检测GATA-3和T-bet基因表达水平的变化。ELISA方法测定DC—CIK细胞释放细胞因子IL-12、IFN一叮、肿瘤坏死因子-α[(TNF—d)的表达水平。结果诱导后的DC—CIK细胞形态规则,经不同浓度的LFA-1单克隆抗体处理后,M啊结果:20雌g/mlLFA-1单克隆抗体封闭组DC—CIK细胞对B95细胞杀伤作用下降最为明显(t=10.138,P〈0.05);RT.PCR与Westernblotting结果:20μg/mlLFA-1单克隆抗体封闭的B95细胞组,GATA-3基因mRNA水平和蛋白水平表达增加最为明显(仁16.386,P〈0.05:t=22.652,P〈0.05);同时T—bet基因mRNA水平和蛋白水平表达降低最为明显(t=17.728,p〈0.05;t=7.452,P〈0.05);ELISA结果:20μg/mlLFA-1单克隆抗体封闭的B95细胞组中细胞因子IL-12、IFN-γ、TNF—d分泌水平下降最为明显(t=21.621,P〈0.05;t=13.739,P〈0.05;t=15.278,P〈0.05)。结论GATA-3和T—bet基因参与了LFA-1/ICAM-1介导的DC—CIK抑瘤途径,并且通过分泌Th1型细胞因子IL-12、IFN-γ、TNF-α等发挥抑瘤作用。

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