细菌内同源重组高效制备含绿色荧光蛋白和抗凋亡基因bcl—XL的重组腺病毒载体

来源 :中国病理生理杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：ccsrg

【摘要】

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目的:制备含绿色荧光蛋白和抗凋亡基因bcl-XL的重组腺病毒载体.方法: 采用PCR方法从质粒pEGFP-C3-bcl-XL中扩增出bcl-XL基因,再亚克隆至腺病毒穿梭质粒中,形成转移质粒pAdTra

【作者】

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罗燕唐仕波李湘刘双信

【机构】

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中山大学中山眼科中心玻璃体视网膜实验室,中山大学附属第一临床医院肝胆外科,广东省人民医院肾内科

【出处】

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中国病理生理杂志

【发表日期】

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2002年12期

【关键词】

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同源重组腺病毒细胞凋亡 BCL-XL基因基因疗法 Recombination Adenovirus Apoptosis Genes bcl-XL

【基金项目】

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国家自然科学基金，广东省自然科学基金，国家"211"工程建设项目

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目的:制备含绿色荧光蛋白和抗凋亡基因bcl-XL的重组腺病毒载体.方法: 采用PCR方法从质粒pEGFP-C3-bcl-XL中扩增出bcl-XL基因,再亚克隆至腺病毒穿梭质粒中,形成转移质粒pAdTrack-CMV-bcl-XL;然后与pAdEasy-1共转化BJ5183菌,采用细菌内同源重组法构建重组腺病毒质粒pAdEasy-1-gfp-bcl-XL,筛选同源重组的阳性克隆;抽提的pAdEasy-1-gfp-bcl-XL经PacI线性化后,再用LIPOFECTAMINETM2000介导转染至人胚肾293

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