EV71病毒P1和3CD基因共表达重组杆状病毒双顺反子穿梭载体的构建及鉴定

来源 :广东医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：chenshu541775136

【摘要】

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目的通过克隆EV71病毒结构前体蛋白P1和非结构蛋白3CD，构建共表达P1前体蛋白和非结构蛋白3CD的重组杆状病毒表达载体。方法设计合成EMCV病毒IRES序列的特异性引物，克隆至含有CM

【作者】

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蔡春林姚相杰赵洁玲卓菲黎剑华

【机构】

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广东省深圳市罗湖区疾病预防控制中心微生物检验科,广东省深圳市疾病预防控制中心微生物检验科

【出处】

：

广东医学

【发表日期】

：

2012年18期

【关键词】

：

肠道病毒71型杆状病毒类病毒颗粒疫苗 enterovirns 71 baculovirus virus like particles vacc

【基金项目】

：

广东省医学科研基金资助项目（编号：B2010287）,广东省深圳市罗湖区软科学研究计划项目（编号：2010069）

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目的通过克隆EV71病毒结构前体蛋白P1和非结构蛋白3CD，构建共表达P1前体蛋白和非结构蛋白3CD的重组杆状病毒表达载体。方法设计合成EMCV病毒IRES序列的特异性引物，克隆至含有CMV启动子的杆状病毒穿梭载体pFastBacDual—CMV上，命名为pFBCMV—IRES。从手足口病重症患者分离EV71病毒株，经RT—PCR技术分别扩增出EV71病毒的P1前体蛋白区与3CD区的片段，定向克隆至杆状病毒穿梭载体pF-BCMV—IRES的IRES序列的上游和下游，随后转化到大肠杆菌DI-15a中，经PC

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