论文部分内容阅读
目的 探讨三阴性乳腺癌(TNBC)细胞能否通过程序性死亡受体-1(PD-1)/程序性死亡配体1(PD-L1)信号通路调节共培养CD4+T细胞的活化、增殖和凋亡,为TNBC患者的免疫治疗提供理论依据.方法 分离健康志愿者人外周血CD4+T细胞,将其与癌细胞系MDA-MB-231进行共培养并分组.空白对照组:CD4+T细胞单独培养;共培养组:CD4+T细胞+MDA-MB-231;PD-L1共培养组:CD4+T细胞+MDA-MB-231+PD-L1单抗;同型抗体共培养组:CD4+T细胞+MDA-MB-231+同型抗体.采用MTT法、流式细胞术分别检测CD4+T细胞增殖、凋亡情况;荧光定量PCR检测CD4+T细胞中调节性T细胞(Treg)相关标志物的表达;ELISA检测各组细胞培养上清液白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-10(IL-10)及转化生长因子β1(TGF-β1)含量变化;West-ern blot检测CD4+T细胞内B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关的X蛋白(Bax)表达变化.结果 与空白对照组相比,共培养组CD4+T细胞增殖率显著降低,凋亡率显著增加,CD4+T细胞中叉头/翼状螺旋转录因子(Foxp3)、CD25、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(CTLA-4)、糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)mR-NA及Bcl-2蛋白表达水平明显降低,CD127 mRNA及Bax蛋白表达水平显著增加(均P<0.01);细胞培养上清液TGF-β1、IL-10含量显著升高,IL-2含量显著降低(均P<0.01).与共培养组相比,PD-L1共培养组上述各指标表达逆转(均P<0.01).结论 三阴性乳腺癌细胞可通过PD-1/PD-L1信号通路抑制共培养CD4+T细胞活化、增殖并促进其凋亡.