【摘 要】
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[目的]分析刺孢吸水链霉菌北京变种(农抗120产生菌)基因组和次级代谢产物组分,研究并鉴定农抗120产生菌中未被发现的活性组分.[方法]利用antiSMASH在线分析农抗120产生菌Streptomyces hygrospinosus var.beijingensis基因组信息,锁定可能的制霉菌素和丰加霉素生物合成基因簇.利用HPLC和LC-MS等分析方法对农抗120产生菌发酵产物进行分析,同时利用制霉菌素和丰加霉素标准品作为对照,以鉴定该菌株代谢组分中的次级代谢产物.此外,通过构建目标基因簇大片段缺失突
【机 构】
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上海交通大学生命科学技术学院,微生物代谢国家重点实验室,上海200030
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[目的]分析刺孢吸水链霉菌北京变种(农抗120产生菌)基因组和次级代谢产物组分,研究并鉴定农抗120产生菌中未被发现的活性组分.[方法]利用antiSMASH在线分析农抗120产生菌Streptomyces hygrospinosus var.beijingensis基因组信息,锁定可能的制霉菌素和丰加霉素生物合成基因簇.利用HPLC和LC-MS等分析方法对农抗120产生菌发酵产物进行分析,同时利用制霉菌素和丰加霉素标准品作为对照,以鉴定该菌株代谢组分中的次级代谢产物.此外,通过构建目标基因簇大片段缺失突变株,并对所得突变株发酵产物进行检测,以确定生物合成基因簇与目的代谢产物的对应关系.[结果]本研究综合利用基因组序列分析、基因缺失突变株构建以及代谢产物检测方法,鉴定了农抗120产生菌中制霉菌素和丰加霉素两种活性成分,并确定了负责这些化合物合成的基因簇.[结论]本研究所构建的多重基因簇失活突变株为挖掘刺孢吸水链霉菌北京变种更多的天然次级代谢产物奠定了基础.
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