低剂量免疫抑制剂诱导人脐带间充质干细胞自噬并促进CXCR4的分泌

来源 :中华器官移植杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ouyang0078
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目的

分析低剂量免疫抑制剂诱导人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)产生自噬,并对趋化因子受体CXCR4分泌的影响。

方法

低剂量的免疫抑制剂他克莫司和西罗莫司分别处理MSC后,流式细胞术检测hUC-MSC细胞表面标志物变化,WST-1法检测hUC-MSC细胞增殖的影响;并通过qRT-实时聚合酶链反应(PCR)检测自噬基因LC3B、Atg5、Beclin1 mRNA水平的变化,及Western blot检测他克莫司和西罗莫司诱导的自噬相关蛋白LC3B、Atg5、Beclin1和p-ULK1的表达;同时流式细胞术也分析了在hUC-MSC产生细胞自噬的状态下趋化因子受体CXCR4的分泌。

结果

低剂量的免疫抑制剂他克莫司和西罗莫司并不引起hUC-MSC细胞表面标志物分子的表达明显改变,且低剂量的他克莫司对hUC-MSC完全没有细胞毒性作用,而西罗莫司对hUC-MSC的细胞增殖有一定的抑制作用,24 h和48 h的存活率分别为73.66%或68.81%,P<0.05具有统计学意义。他克莫司和西罗莫司都能通过抑制PI3K/AKt/mTOR信号通路激活hUC-MSC自噬,自噬相关蛋白LC3B、Atg5和Beclin1表达显著上调,并诱导CXCR4分泌上调。

结论

低剂量免疫抑制剂他克莫司和西罗莫司能诱导人脐带间充质干细胞hUC-MSC产生自噬并促进CXCR4的分泌。

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