【摘 要】
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建立一种纯度较高的原代大鼠脑微血管内皮细胞的分离培养方法。取7～10日龄SD大鼠脑组织,经匀浆,牛血清白蛋白密度梯度离心,Ⅱ型胶原酶消化获得脑微血管段后,置于CO2培养箱中进
【机 构】
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福建中医药大学中医学院12016级中医专业5年制本科,福建中医药大学中医学院中医基础理论教研室
【基金项目】
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国家自然科学基金(81373528,81072714);福建省自然科学基金(2017J01545);2018年福建省大学生创新创业训练计划项目(201810393033)
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建立一种纯度较高的原代大鼠脑微血管内皮细胞的分离培养方法。取7～10日龄SD大鼠脑组织,经匀浆,牛血清白蛋白密度梯度离心,Ⅱ型胶原酶消化获得脑微血管段后,置于CO2培养箱中进行原代培养。通过细胞形态学观察、第Ⅷ因子相关抗原免疫细胞化学染色鉴定所培养的细胞。在倒置显微镜下,体外培养24～48 h后,细胞从贴壁的脑微血管段周围爬出,单个细胞为短梭形或多角形,呈团簇状单层贴壁生长,待细胞密集融合后,则成典型的"铺路石样"涡旋状排列;Ⅷ因子免疫细胞化学染色检测,相关抗原表达为阳性,细胞胞质显棕黄色,阳性细胞率达99%以上。该方法能够成功分离培养出原代大鼠脑微血管内皮细胞。
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