【摘 要】
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为建立高白鲑肌肉蛋白质双向电泳分析方法,通过固相pH梯度胶条等电聚焦和SDS-PAGE垂直电泳对蛋白质进行分离,分别考察了蛋白质样品制备方法、上样量、IPG胶条pH值、等电聚焦
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(0425/KZ0039)
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为建立高白鲑肌肉蛋白质双向电泳分析方法,通过固相pH梯度胶条等电聚焦和SDS-PAGE垂直电泳对蛋白质进行分离,分别考察了蛋白质样品制备方法、上样量、IPG胶条pH值、等电聚焦程序、助凝剂剂量、SDS-PAGE凝胶浓度及染色方法等影响的因素。结果显示,采用丙酮沉淀法制备蛋白质样品,上样量90μg,IPG胶条pH值5~8,一向胶聚焦时间400V16h+1000V2h,平衡时间15min,0.05mL过硫酸铵及2μLTEMED,10%(体积分数)二向分离胶和硝酸银染色时,获得蛋白质分离效果好,分辨率高及横纹少
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