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目的 构建携带野生型Rheb(WT)和Rheb突变体(持续活化型Q64L和显性失活型D60K)重组腺病毒载体,验证其携带的Rheb WT和Rheb突变基因在MCF-7细胞中的表达情况及其对血清饥饿的乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖的影响.方法 采用细胞内同源重组法构建携带Rheb和Rheb突变体的重组腺病毒载体pacAd5 CMV-Rheb,PCR法检测病毒上清;将病毒上清感染MCF-7细胞后Western blotting (WB)检测Rheb及下游产物表达.将重组腺病毒感染血清饥饿的乳腺癌细胞MDA