【摘 要】
:
目的:探讨微小RNA-221(miR-221)对内毒素(LPS)诱导的脓毒症血管内皮细胞损伤的影响及机制.方法:使用100 ng· ml-1的LPS诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)构建脓毒症血管内皮细胞损伤模型,通过脂质体转染技术将miR-221 inhibitors转染至LPS诱导的HUVECs,实验分为对照(Con)组、模型(IPS)组、转染对照(LPS+ anti-miR-NC)组和转染(LPS+ anti-miR-221)组.实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western
【机 构】
:
青海大学附属医院急诊ICU,青海西宁810000
论文部分内容阅读
目的:探讨微小RNA-221(miR-221)对内毒素(LPS)诱导的脓毒症血管内皮细胞损伤的影响及机制.方法:使用100 ng· ml-1的LPS诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)构建脓毒症血管内皮细胞损伤模型,通过脂质体转染技术将miR-221 inhibitors转染至LPS诱导的HUVECs,实验分为对照(Con)组、模型(IPS)组、转染对照(LPS+ anti-miR-NC)组和转染(LPS+ anti-miR-221)组.实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞中miR-221和CDKN1B的表达情况,酶联免疫吸附法(ELISA)检测白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α),流式细胞术检测细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法(Western blot)分析凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关的X(Bax)和活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)的表达水平,生物信息学软件TargetScan预测miR-221的靶基因,双荧光素酶报告基因实验验证miR-221和CDKN1B之间的靶向作用关系.同时抑制miR-221和CDKN1B的表达,采用同样的方法检测细胞凋亡和炎症因子表达情况.结果:与Con组相比,LPS组miR-221、Bax和Cleaved Caspase-3的表达明显升高,CDKN1B和Bcl-2的表达明显降低,炎症因子IL-6、IL-1β和TNF-α的含量明显增多,凋亡率明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与LPS组和LPS+anti-miR-NC组相比,LPS+ anti-miR-221组细胞凋亡率、Bax和Cleaved Caspase-3的表达水平均明显降低,Bcl-2的相对表达水平明显升高,而炎症因子IL-6、IL-1β和TNF-α的含量明显减少,差异均有统计学意义(P<0.05).双荧光素酶报告基因实验证实了miR-221和CDKN1B存在靶向结合关系.结论:抑制miR-221能够逆转LPS对HUVECs损伤的影响;抑制CDKN1B可逆转抑制miR-221对LPS诱导的HUVECs损伤保护作用;miR-221可通过靶向CDKN1B调控脓毒症血管内皮细胞凋亡和的炎症反应.
其他文献
目的:研究不同绝经状态下中年女性血脂异常的可控风险因素,并提出预防策略.方法:纳入2018年1月至2019年1月于哈尔滨医科大学附属第一医院体检的1011名40~60岁女性为研究对象,采用问卷调查进行饮食评估,并进行体格测量和生化指标检测.根据绝经状态将研究对象分为绝经前期、围绝经期和绝经后期3组,比较不同绝经状态下中年女性生活方式、膳食摄入、慢性病及生化指标的差异;再根据血脂正常或异常分两组,采用Logistic回归分析以上差异指标中与不同绝经状态女性的血脂异常相关的可控风险因素.结果:不同绝经状态研究
目的:观察内质网应激在肥胖高血压大鼠心肌重构中的作用.方法:5周龄雄性自发性高血压大鼠(SHR)高脂饮食制备肥胖高血压大鼠模型(OBH组),以年龄、性别匹配的WKY大鼠和SHR作为WKY组和SHR组,10周后观察体重、心脏重量、左室重量、血压,使用小动物超声测定心脏超声,测定血清和心肌血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量,TUNEL检测心肌细胞凋亡,Western blot和实时聚合酶链反应(RT-PCR)测量内质网应激分子表达水平.结果:(1) OBH组Lee\'s指数及肝脏重量指数高于其余两组(P<0.0
目的:分析microRNA-19(miR-19)在子宫内膜癌组织中的表达及其对子宫内膜癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响.方法:采用TCGA数据库分析miR-19在癌组织和正常组织中的表达差异,qRT-PCR法检测子宫内膜癌组织和癌旁组织中miR-19的表达差异以及分析miR-19的表达与临床特征的关系;采用Transwell和细胞划痕实验检测miR-19对人子宫内膜癌细胞(KLE细胞)迁移和侵袭能力的影响;Western blot检测miR-19对PI3K/Akt信号通路的影响.结果:子宫内膜癌组织中miR-
目的:探讨重症心力衰竭行左卡尼汀配合辅酶Q10治疗的效果与安全性.方法:选取佳木斯市中心医院2020年2月至2021年2月期间收治的58例重症心力衰竭患者,按入院先后顺序分为对照组和观察组,各29例.对照组实施酒石酸美托洛尔+氯沙坦+螺内酯常规治疗方案,观察组在对照组的基础上给予左卡尼汀配合辅酶Q10治疗,比较两组疗效、治疗前后超敏C反应蛋白(hs-CRP)、脑钠肽(BNP)、心肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)指标水平及不良反应情况.结果:观察组患者治疗总有效率为89.66%,高于对照组的65.52%,差异具有统计
糖尿病已成为全球公共卫生问题.为了提高糖尿病知晓率和预防或延缓糖尿病发生,本共识专家组在综合循证医学证据基础上,基于深圳市糖尿病防控现状制订了针对糖尿病高危人群社区主动筛查的工作规范和糖尿病前期人群社区干预和分层管理共识建议.本共识具有良好的实用性和可执行性.期望在糖尿病分级诊疗、医防融合实践中对其进一步完善并加以推广应用,以促进糖尿病防控工作的不断进步.
目的:探讨南京某高校教职工非酒精性单纯性脂肪肝(NAFL)患病率及与估算的肾小球滤过率(eGFR)相关性.方法:以某高校2019年5~12月健康体检的教职工为研究对象,检测一般资料、生化指标及肝脏超声.结果:2068例受试者,NAFL患者736例,患病率为35.59%,随年龄增加男性NAFL患病率有上升趋势(P <0.001),60岁以下男性NAFL患病率高于女性(P<0.05);与非NAFL组相比,NAFL组具有较高的体重指数(BMI)、腰围、收缩压、舒张压、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、空腹血糖(GLU
目的:探讨支气管动脉栓塞术(BAE)治疗结核性大咯血的疗效.方法:回顾性分析2018年7月至2020年3月因肺结核大咯血至本院就诊并接受BAE治疗的96例患者临床资料,收集患者术前CT血管造影(CTA)和(或)CT肺动脉血管造影(CTPA)、术中探及的病变血管影像学表现、病变血管来源、栓塞材料及方法等资料,分析患者术后疗效及复发的相关原因.结果:96例结核患者中87例术后恢复良好,术后随访未再发咯血,9例患者术后复发,复发率为9.38%,其中男6例,女3例.术后24 h再发者1例,术后1~2周内再发者5例
目的:探讨授权理论联合图文式健康教育在青少年特发性脊柱侧凸(AIS) Boston支具治疗中的应用效果.方法:选取2017年1月至2020年12月在我院骨科门诊初次接受Boston支具治疗的AIS患者120例,随机分为观察组和对照组.观察组在传统教育基础上,辅以授权理论联合图文式健康教育的自我管理项目,对照组仅实施传统教育模式.比较两组患者脊柱侧弯畸形治疗效果、自我管理效能、治疗依从性和心理健康状态.结果:平均随访(26.5±8.3)个月,共7例失访.最终,观察组59例和对照组54例患者入选本研究.末次随
目的:探讨自回归移动平均乘积季节模型(SARIMA)在成都市龙泉驿区出生缺陷率预测中的构建与应用的可能性.方法:将出生缺陷监测数据通过预处理、模型识别、参数估计和模型诊断建立SARIMA模型,并对模型进行评价与预测.结果:成都市龙泉驿区的出生缺陷发生率为一个非平稳时间序列且具有一定的季节性.通过自相关系数和偏相关系数建立了ARIMA(1,1,2) ×(1,1,1)12乘积季节模型,该模型的残差经白噪声检验(Ljung-Box检验)为白噪声序列(P>0.05);在预测2019年10月至2019年12月的出生
目的:探讨肾功能不全对脓毒症血流感染患者病原菌分布及预后的影响.方法:选择2016年6月至2020年11月收治的肾功能不全并发脓毒症血流感染患者137例为肾功能不全组,按照1∶2匹配原则,选择同期274例血流感染脓毒症无肾功能不全为非肾功能不全组,采用微生物鉴定与药敏分析系统检测分析两组患者感染病原菌分布及其耐药情况,并比较两组患者预后情况.结果:脓毒症血流感染主要由革兰阴性菌引起(肾功能不全组占58.62%,非肾功能不全组占70.92%).肾功能不全组主要病原菌为肺炎克雷伯菌、葡萄球菌、肠球菌和大肠埃希