提高碱性磷酸酶在E.coli胞内表达的可溶性及活性

来源 :浙江工业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tk6014
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以E.coliDH5α基因组为模板PCR扩增得到无信号肽的碱性磷酸酶基因片段,与胞内融合表达型T载体连接得到重组质粒,转化表达宿主E.coliBL21(DE3)和E.coliorigami(DE3),经0.1 mM IPTG诱导表达,超声破碎细胞后,SDS-PAGE分析可溶性,融合蛋白在E.coliorigami(DE3)中的可溶蛋白含量比E.coliBL21(DE3)中高.融合蛋白的可溶部分经Ni2+螯合亲和纯化,纯化后E.coliorigami(DE3)中蛋白活性比E.coliBL21(DE3)中明显
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