小麦细胞分裂素氧化酶基因TaCKX1原核表达载体的构建及表达

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目的:构建小麦细胞分裂素氧化酶基因TaCKX1原核表达载体并进行表达,以期得到大量的His标签融合蛋白。方法:根据GenBank中的TaCKX1序列以及pET-24a载体中的多克隆位点设计引物,以含有TaCKX1编码基因的批pMD-QRCKX1重组质粒为模板,经PCR扩增得到TaCKX1基因的DNA片段。将所得的片段与pET-24a载体连接,转化DH5α大肠杆菌,筛选阳性克隆,其测序结果与原序列一致,表明原核表达载体pET-TaCKX1已构建成功。提取pET-TaCKX1质粒转化到BL21(DE3)ply
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