【摘 要】
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固醇调节元件结合蛋白(SREBP)是机体调控脂质合成的重要转录因子,其作用靶标是所调控基因启动子区域的SRE元件,构建该元件报告质粒对于评价SREBP相关活性物质的作用机制具有
【基金项目】
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安徽省自然科学基金资助项目(11040606M92)
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固醇调节元件结合蛋白(SREBP)是机体调控脂质合成的重要转录因子,其作用靶标是所调控基因启动子区域的SRE元件,构建该元件报告质粒对于评价SREBP相关活性物质的作用机制具有重要意义。文章扩增或人工合成了人LDLr基因启动子区域SRE元件1次重复片段或3次重复片段,将其插入荧光素酶报告基因载体pGL3-basic中,构建了2种含有人SRE元件的荧光素酶报告质粒;将该报告质粒转染到人肝癌细胞HepG2中,胰岛素处理可以显著活化荧光素报告质粒,而25-羟基胆固醇和胆固醇结合处理可以强烈抑制。结果表明,所构建的质粒能成功地反映SREBP活性的改变,为体外快速检测SREBP活性相关调控物质提供了一个有效的平台。
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