【摘 要】
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从谷氨酸棒杆菌（Corynebacterium glutamicum）中克隆得到L-天冬氨酸α-脱羧酶基因panD。将该基因连接到pET-24a载体上,并在Escherichia coli BL21（DE3）中实现了成功表达。蛋白电
【机 构】
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江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(31070711);新世纪优秀人才项目(NCET-10-0461)
论文部分内容阅读
从谷氨酸棒杆菌（Corynebacterium glutamicum）中克隆得到L-天冬氨酸α-脱羧酶基因panD。将该基因连接到pET-24a载体上,并在Escherichia coli BL21（DE3）中实现了成功表达。蛋白电泳检测显示,PanD自裂解后形成的α亚基和β亚基,即PanD重组酶具有自身加工功能。重组酶的比酶活高达2.60 U/mg（156 mmol/g·h）。酶学性质研究表明,其最适温度为55℃,最适pH为7.0。80℃条件下,PanD的半衰期约为40 min。在37℃,pH7.5条件下,Km值为4.26 mmol/L,Vmax为35.97 nmol/min,kcat为1.02/s,催化效率kcat/Km为0.24 L/mmol·s。
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